Что такое счв: СЧВ — это… Что такое СЧВ?

Содержание

что означает, как переводится на английский язык, кто такой чсвшник

Распространение сети интернет породило особую культуру. Многие слова пришли в русский язык с англоязычных сайтов. Аттеншенвхора, мем, пруф — все это становится частью жизни. ЧСВ расшифровывается как «чувство собственной важности». Активно используется на разного рода форумах. Чсвшником называют пользователя, который слишком высокого мнения о себе.

Происхождение термина

Аббревиатура ЧСВ появилась не с приходом интернета в повседневную жизнь. Впервые об этой концепции написал Карлос Кастанеда. В своих книгах он описывал ЧСВ следующими качествами:

чувство превосходства над чем-либо;
чувство превосходства над кем-либо;
ощущение значимости своих поступков;
ощущение значимости самого себя.

Главный герой книг Кастанеды, дон Хуан, потратил много времени, чтобы объяснить, как расшифровывается ЧСВ. Оно не появляется у человека изначально с момента рождения, его приносит внешняя среда, после чего индивид

вынужден постоянно проверять свою важность и значимость. В результате происходит пересмотр системы жизненных ценностей. Она делится на два блока: удовлетворяет ЧСВ и не удовлетворяет ЧСВ. В первый список попадает все, даже сама жизнь индивида.

Чувство собственной важности деструктивно и не приносит никаких изменений. Именно потеря этого состояния заставляет вступить на путь воина.

Современные представления

ЧСВ на английский язык переводится как self-importance. Благодаря распространению социальных сетей, любой человек может завысить свое чувство значимости. Достаточно прикрыться аватаркой и можно вести себя как угодно. ЧСВ можно заменить словами чванство, гордыня, высокомерие.

На лурке (известный сайт Луркоморье, посвященный сбору фольклора интернета) расшифровка ЧСВ следующая: чувство собственной важности, значимости, величия. Его стоит отделять от других черт личности.

Так, публичность и известность человека не всегда связана с его переоцениванием себя. Поэтому нельзя записывать в ряды «зазнавшихся» всех, кто мало-мальски известен. Туда нельзя относить и людей «опасных» профессии: полицейских, военных. В таких структурах существует четкая иерархия. Поэтому если прапор орет — это не значит, что он самоутверждается, он просто выполняет свою работу.

Нельзя путать зазнайство с аргументированной критикой. Если индивид считает, что рак лечится содой, то его клиентов нужно оповестить о химическом составе этого вещества. Однако все равно будут сторонники позиции «плацебо лечит, а кто не верит, тот завидует».

Зазнайство нельзя путать с хорошим знанием предмета. Популярные критики на ютубе делают обзоры на фильмы не из-за чувства своей значимости. Они пересмотрели большое количество фильмов и сериалов и могут рассуждать о клише и некачественной игре актеров.

Соцсети и онлайн-игры

Чувство собственной важности можно сократить до аббревиатуры ЧСВ. В социальной сети Вконтакте легко обнаружить людей, страдающих этим свойством. В дискуссиях такой человек считает свое мнение важным и гордится собой. Отличительные качества чсвшника:

не воспринимает критику в свой адрес;
не воспринимает людей как равных;
тщеславен и честолюбив;
любит свой аккаунт и привлекает к нему внимание.

Чсвшники в большом количестве водятся на просторах онлайн-игр. Самая популярная на территории России — Дота. Она направлена на командную игру. В одной группировке собираются люди разного уровня мастерства, и это порождает конфликты. Чсвшники хвалятся своим уровнем мастерства, заявляя свою ценность как игроков.

Опасность ЧСВ и как не попасть в ловушку

«Я центр мира» — вот что значит ЧСВ. Такая позиция не приносит пользу, только вред. Кому понравится общаться с человеком, который ставит свои интересы выше других? Вряд ли с ним будет приятно работать. Даже близким людям рано или поздно надоест угождать капризам чсвшника, и они прервут с ним отношения.

Быть одиноким — вот что означает ЧСВ. Мало кто задумывается над тем, что позиция «я знаю все лучше всех» вредит самому человеку. Это прямой путь к деградации, эмоциональной глухоте, отсутствию саморазвития.

Чтобы не впасть в состояние ЧСВ, нужно постоянно анализировать свое поведение. Задавая себе вопрос, почему я так себя веду и что это даст, любой человек будет контролировать свою самооценку.

Нужно учиться уважать чужую точку зрения, сохранять верность себе, но прислушиваться к другим людям. Находясь в социальных сетях, следует хорошо подумайть, прежде чем ввязываться в пустой спор. Стоит ли он траты сил? Скорее всего, нет, то же самое касается и онлайн-игр. Не стоит поддаваться на провокации и поддерживать конфликты в чатах, особенно если они содержат только оскорбления.

Originally posted 2018-05-29 07:17:45.

5. Природа СЧВ.. Введение в психиатрию и психоанализ для непосвященных

Шестое чувство — Школа Олега Андреева

Форма обучения — Очная и заочная.

Цель обучения — Развитие интуиции и биоэнергетического потенциала.

Результат обучения — Способность интуитивного мышления, активизация подсознательной деятельности.

Программа «Шестое Чувство» — развитие потенциала и интуиции

Школа Олега Андреева предлагает уникальную программу обучения «Шестое Чувство», целью которой является развитие потенциала человека, развитие интуиции, развитие образного мышления, телепатия и ясновидение и мн. другое.

«Шестое Чувство» — это уникальная программа, в основу которой положена биоэнергетика и биолокация. На сегодняшний день биоэнергетика и биолокация являются хорошо изученными научными сферами, позволяющими совершенствовать творческие, трудовые и другие внутренние способности человека. Развитие потенциала позволяет среднестатистическому человеку отыскать в себе сокрытый резерв физических и ментальных сил, направить которые можно в самые разные русла. Медитативная практика, биорезонансные тренировки с маятником и рамками биолокоцаии — все это лишь незначительная часть методики, с которыми предстоит работать нашим ученикам. Развитие человеческого потенциала — многогранное направление деятельности психологов всего мира. Наша школа предлагает развитие человеческого потенциала в самых различных направления: психология, творчество, телепатия и ясновидение, сверхчувственное восприятие и прочее.

Развитие потенциала по программе «Шестое Чувство» предоставляет возможность получения глубоких знаний в области нейролингвистического программирования. Сегодня развитие интуиции — доступная и простая программа обучения, не требующая специализированной психологической и физической подготовки.

Профессиональная медитация позволит вам осуществить развитие творческого потенциала, усовершенствовать интуитивное мышление, повысить потенциал развития предприятия за счет новых возможностей и многое другое.

Развитие интуиции по программе «Шестое Чувство»

Основная цель программы «Шестое Чувство» — развитие интуиции и повышение остроты сверхчувственного восприятия. Каждый из нас знает, что интуитивное мышление — это, своего рода, вдохновение, предоставляющее огромные преимущества человеку. К сожалению, без специальных программ развитие интуиции доступно только очень одаренным людям, которые обладают врожденным талантом. Тем не менее, развитие творческого потенциала, развитие образного мышления, развитие трудового потенциала, как и развитие интуиции, доступно каждому человеку при прохождении специализированных обучающих курсов.

Сверхчувственное восприятие — это внутренний голос, подсказывающий нам правильное решение в различных жизненных ситуациях. Медитация — это психотерапевтический метод, позволяющий проявить и стимулировать внутренние возможности человека или группы лиц. Опытный специалист может без особых проблем осуществить не только развитие творческого потенциала одного человека, но и оценить потенциал развития предприятия любых масштабов.
Развитие человеческого потенциала — задача не из легких, поскольку в каждом конкретном случае требует решения индивидуальных проблем для раскрепощения путей информационного потока.

Медитативная практика: специфика и особенности

Каждый психолог знает, что медитация должна осуществляться только опытным, квалифицированным специалистом, в противном случае психотерапевтическое вмешательство может быть совершенно неэффективным. Нужно понимать, что медитация— это многоуровневый процесс, способный дать видимые результаты только при прохождении всего курса обучения. Основная особенность медитации — её абсолютная безопасность для здоровья человека при неограниченных возможностях развития трудового потенциала, интуитивного мышления, сверхчувственного восприятия.

Инструментарий программы «Шестое Чувство» достаточно обширен, поэтому составление индивидуальных методик не представляет собой особой сложности для наших специалистов. Подсознание, которое развивается с помощью сеансов медитации и таблицы Андреева «Шестое чувство», имеет самые невероятные возможности. Руководитель, обладающий интуитивным мышлением, может стимулировать развитие потенциала организации, а сотрудник может заметно повысить свои трудовые способности для достижения определенных целей. В целом, развитие потенциала организации или совершенствование отдельных способностей человека — это, всего лишь, правильное стимулирование умственной и психическое активности.

Индукционные плавильные печи 5-200 кг

Индукционные тигельные печи с транзисторным преобразователем предназначены для плавки от 5 до 200 кг цветных металлов и плавки от 5 до 100 кг черных металлов. Они мобильны, при необходимости легко переставляются с места на место. Индукционные печи комплектуются универсальным среднечастотным транзисторным высоковольтным преобразователем марки СЧВ. Если у вас имеются ограничения по подключаемой мощности, можно легко подобрать именно ту мощность преобразователя, которая вам необходима, с соответствующей коррекцией веса плавки.

Транзисторные индукционные нагреватели марки СЧВ могут использоваться самостоятельно для нагрева массивных деталей перед кузнечной обработкой. В том числе и в составе индукционного кузнечного нагревателя ИКН. А так же для глубокой закалки деталей в сочетании со среднечастотным закалочным трансформатором. Покупая индукционную плавильную тигельную печь вы можете быть уверены в самом разнообразном применении ее комплектующих.

Индукционные печи для плавки 5-200 кг могут быть укомплектованы как керамическими, так и графитовыми тиглями. Причем керамические тигли применяются для плавки металлов с ферромагнитными свойствами, такими как сталь и чугун.

Графитовые тигли косвенного нагрева применяются в основном для плавки цветных металлов, таких как медь, латунь, бронза, золото, серебро. Однако графитовые тигли могут применяться для плавки стекла и кремния. Для плавки алюминия могут использоваться стальные и чугунные тигли.

Индукционные плавильные печи с транзисторным преобразователем имеют ряд существенных преимуществ:

Высокий КПД транзисторного преобразователя, доходящий до 98%. Однако небольшая толщина тигля и засыпной футеровки способствует потерям тепла. И поэтому необходимо стараться производить плавку как можно быстрее. Следующую плавку желательно производить на горячем тигле.
Высокая производительность индукционных плавильных печей достигается за счет высокой удельной мощности на единицу веса расплава.
Только в индукционных плавильных печах возможно получение сплавов с самыми лучшими свойствами. При плавлении, расплав интенсивно перемешивается за счет электродинамической циркуляции, чем достигается его высокая гомогенность (однородность). Стали выплавленные в индукционных плавильных печах выдерживают до образования закалочных трещин до 30 циклов закалка — отпуск. А стали, выплавленные в любых других печах не более 20 циклов.
Индукционные печи с весом плавки 5-200 кг просты в обслуживании, их легко очищать от шлаков и налипшего металла. Применение редуктора и ручного штурвала позволяет легко производить разливку расплава. Они очень компактны, что позволяет размещать их на ограниченных площадях.
Замена тигля на данных печах, так же достаточно простая операция. Мы даем рекомендации нашим клиентам по подбору и замене китайских тиглей на тигли российских производителей.
Сервисная служба компании «Мосиндуктор» производит любой ремонт индукционных плавильных печей с весом плавки от 5 до 200 кг. В том числе ремонт блока конденсаторов, ремонт транзисторного преобразователя, ремонт плавильного узла, с полной разборкой и заменой футерованной индукционной катушки.
Несмотря на то, что индукционные плавильные печи с транзисторным преобразователем работают в звуковом диапазоне частот 1-8 кГц, звуковой фон и шум от их работы совсем незначительный. Воздействующее на человека индукционное поле, так же невелико, что обусловлено небольшой мощностью транзисторного преобразователя и его низкой рабочей частотой.

Внимание: По водоохлаждаемому тоководу от конденсаторной батареи к плавильному узлу текут резонансные токи большой величины. Во избежание перегорания тоководов, необходимо исключить их прилегание к любым металлическим элементам: пола, станины печи, корпуса преобразователя и т.п.

Индукционные плавильные печи с весом плавки 5-200 кг с транзисторным преобразователем:

Название	Мощность, кВт	Загрузка по стали/чугуну, кг	Загрузка по меди и драг металлам, кг	Масса, кг
ИПП-15	15	4	10	90
ИПП-25	25	8	20	120
ИПП-35	35	12	40	140
ИПП-45	45	18	70	215
ИПП-70	70	28	100	245
ИПП-90	90	45	120	285
ИПП-110	110	60	150	295
ИПП-160	160	100	200	335

Комплектность поставки индукционной плавильной печи:

— Среднечастотный высоковольтный индукционный нагреватель СЧВ — 1 шт.
— Блок водоохлаждаемой конденсаторной батареи — 1 шт.
— Плавильный узел в сборе, с устройством наклона печи — 1 шт.
— Межблочные соединительные кабели — 1 к-т.
— Водоохлаждаемые тоководы — 1 к-т.
— Инструкция по эксплуатации — 1 шт.
— Инструкция по технике безопасности — 1 шт.

Время плавки для всех индукционных печей около 1 часа. Учтите, что в комплект печи не входит система водяного охлаждения, насос и бак для воды. Самым лучшим решением для системы охлаждения является двухконтурная градирня, которую вы можете заказать и купить в компании «Мосиндуктор». Так же вы можете приобрести у нас чиллер для охлаждения транзисторного преобразователя, а печь охлаждать проточной или оборотной водой.

Компания «Мосиндуктор» уже поставила клиентам и обслуживает десятки индукционных плавильных печей данного типа по всей России. Приобретение индукционных плавильных печей с весом плавки от 5 до 200 кг являются одним из лучших вариантов начала собственного металлургического дела и расширения уже действующего.

Видео товара:

Сопутствующие товары

Автор статьи директор компании «Мосиндуктор»
© 2013 Кучеров Вячеслав Васильевич
Авторские права защищены.
Гарантируется судебное преследование
за размещение статьи или ее части
на любом сайте кроме www.mosinductor.ru

Методы цитохимического и иммуноцитологического исследования клеток крови и кроветворных органов

Лабораторная диагностика онкогематологических заболеваний основывается на изучении мазков периферической крови и костного мозга, окрашенных по Паппенгейму (Маю — Грюнвальду — Романовскому — Гимзе). Для уточненного выделения отдельных форм и цитологических вариантов острых лейкозов, наряду с учетом цитоморфологических признаков лейкозно трансформированных клеток, используются результаты цитохимических, иммуноцитологических, молекулярно-генетических исследований [1–3].

Наиболее доступными для применения в лабораториях областных и городских больниц являются цитохимические методы. Из большого числа разнообразных методик, позволяющих во многих случаях охарактеризовать линейную принадлежность лейкозных клеток, наиболее широко используются реакции определения активности миелопероксидазы (МПО), щелочной фосфатазы (ЩФ), кислой фосфатазы (КФ), неспецифической -нафтилацетатэстеразы ( -НЭ), кислой неспецифической эстеразы (КНЭ), нафтол-AS-D-хлорацетатэстеразы (ХАЭ), -глюкуронидазы ( -Гл), дипептидиламинопептидазы IV (ДАП IV), окраска липидов суданом черным В (СЧВ) и PAS-реакция [4–10]. Сравнение результатов исследований, проводимых в различных лабораториях, облегчается благодаря применению единых методик, рекомендованных Международным комитетом по стандартизации в гематологии (ICSH) [11]. Подобные методы широко используются для определения активности МПО, ЩФ, КФ, НЭ, ХАЭ [7].

Цитохимические методы

Выявление активности миелопероксидазы методом Loele (1936) [4, 5]

Фиксация мазков крови, костного мозга и отпечатков лимфатических узлов в парах 10% раствора нейтрального формалина в течение 3 мин.
Нанесение на мазки на 6 мин инкубационной смеси следующего состава:
• бензидин (или ДАБ) 20 мг
• 40% этиловый спирт 10 мл
• 3% раствор перекиси водорода 0,02 мл
Промывание в воде и высушивание.
Результат. В местах локализации МПО в цитоплазме клеток обнаруживаются гранулы желтовато-коричневого цвета.
Миелопероксидаза является маркером клеток гранулоцитарного ряда со стадии миелобласта. Она обнаруживается в промиелоцитах, миелоцитах, метамиелоцитах, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофильных лейкоцитах и эозинофилах. Более слабая активность МПО может выявляться в монобластах и моноцитах. Лимфоциты, клетки эритробластического и мегакариоцитарного ряда, базофилы дают отрицательную реакцию при выявлении активности МПО.
Липиды. Цитохимические методы выявления липидов базируются на способности бисазосоединений или других инертных красителей растворяться в жирах. Наиболее приемлемым при определении основного компонента жироподобных веществ кроветворных клеток (липидов) является диазокраситель СЧВ.

Выявление липидов окраской суданом черным В по Ackerman (1952) [5]

Фиксация мазков крови, костного мозга и отпечатков лимфатических узлов в парах 10% нейтрального формалина в течение 3 мин.
Погружение на 2 мин в 5% раствор лимонной кислоты.
Тщательное промывание мазков в проточной, дистиллированной воде и высушивание.
Окраска в насыщенном растворе СЧВ в течение 60 мин.
Насыщенный раствор СЧВ получают путем растворения 0,1 г красителя в 100 мл 70% этилового спирта, доводят раствор до кипения, охлаждают, фильтруют и оставляют для созревания на 7 дней.
Промывание мазков в 70% этиловом спирте.
Промывание в воде и высушивание.Результат. Липиды обнаруживаются в виде серовато-черных и черных гранул в цитоплазме клеток.
Окрашивание липидов СЧВ, подобно МПО, является маркерным признаком молодых, незрелых и зрелых клеток гранулоцитарного ряда. Результаты этих двух цитохимических реакций дублируют друг друга и служат своеобразным контролем точности определения линейной принадлежности кроветворных клеток.
Щелочная фосфатаза. Применяющиеся для выявления активности лейкоцитарной щелочной фосфатазы (фосфогидролазы моноэфиров ортофосфорной кислоты, КФ 3.1.3.1) цитохимические методы одновременного азосочетания основаны на ферментативном гидролизе эфиров фосфорной кислоты с ароматическими производными (фосфаты азотолов) и реакции освобождающихся замещенных нафтолов с солями диазония с образованием в участках локализации ферментативной активности нерастворимого осадка азокрасителя.

Выявление активности щелочной фосфатазы методом одновременного азосочетания по Kaplow (1955) [5, 12]

Фиксация свежеприготовленных и высушенных на воздухе мазков крови и костного мозга в парах 10% раствора нейтрального формалина в течение 3 мин.
Инкубация мазков в темноте в течение 2 ч при комнатной температуре в среде следующего состава:

нафтол-AS-BI-фосфат или нафтол AS-MX-фосфат 35 мг
прочный синий РР (диазониевая соль 4-бензоил-2,5-метоксианилина) 35 мг • 0,08 М трис-HCl буфер, рН 9,2 35 мл.
Приготовление 0,08 М трис-солянокислого буфера рН 9,2-9,4:
трис-(оксиметил)-аминометан 121 мг
дистиллированная вода 49 мл
0,1 н. соляная кислота 1 мл

Промывание мазков в воде и высушивание.

Результат. В цитоплазме клеток, обладающих активностью ЩФ, обнаруживаются гранулы синего цвета. Активность ЩФ, выраженная в различной степени, определяется в нейтрофильных метамиелоцитах, палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилах, остеобластах, клетках эндотелия сосудов и синусов костного мозга [5, 6, 8].
Кислая фосфатаза. Цитохимическое выявление активности кислой фосфатазы (фосфогидролазы моноэфиров ортофосфорной кислоты, КФ 3.1.3.2) также производится с помощью метода одновременного азосочетания. Для связывания освобождающихся под действием фермента замещенных нафтолов чаще используется гексаазотированный парарозанилин.

Определение активности кислой фосфатазы методом одновременного азосочетания по Goldberg, Barka (1962) [5, 13]

2. Инкубация мазков в течение 3 ч при 37 °С в свежеприготовленной и профильтрованной смеси следующего состава:

нафтол-AS-BI-фосфат или нафтол AS-MX-фосфат, растворенный в 0,5 мл ацетона 10 мг
0,05 М ацетатный буфер рН 5,6 25 мл
гексаазотированный парарозанилин 8 капель.

Гексаазотированный парарозанилин предварительно получают в пробирке при смешивании 4 капель 4% раствора нитрита натрия и 4% раствора парарозанилина. Пробирки встряхивают в течение 30 с. О произошедшем гексаазотировании свидетельствует легкое запотевание стенок пробирки и изменение цвета раствора, становящегося янтарно-желтым. Для получения раствора парарозанилина, который может храниться в холодильнике при температуре 4 °С в течение 7–10 дней, 1 г фуксина основного для фуксинсернистой кислоты растворяют в 25 мл 2 н. соляной кислоты при подогревании, охлаждают и фильтруют.

0,05 М ацетатный буфер готовят путем соответствующего разведения 0,2 М раствора (см. ниже).

3. Промывание мазков в воде, высушивание и микроскопирование.

Результат. Активность КФ определяется в виде гомогенной окраски или мелких гранул красного цвета в цитоплазме клеток. В Т-лимфоцитах и Т-лимфобластах наблюдается окрашивание в виде крупных гранул или пятна в одном участке цитоплазмы.

При добавлении в инкубационную среду ингибитора КФ — калиево-натриевой соли виннокаменной (L тартаровой) кислоты в концентрации 0,005 М (352 мг на 25 мл инкубационной смеси) активность фермента в клетках сохраняется только при волосатоклеточном лейкозе и В-пролимфоцитарном лейкозе [5, 8].

Эстеразы. В группу эстераз входят ферменты, субстратом которых являются эфиры карбоновых кислот. В онкогематологии широкое применение нашло цитохимическое выявление активности неспецифических эстераз, гидролизирующих алифатические эфиры со сравнительно короткой цепью. При определении активности неспецифической эстеразы (гидролазы эфиров уксусной кислоты, КФ 3.1.1.6) в кроветворных клетках с использованием в качестве субстрата реакции -нафтилацетата, нафтол-AS-ацетата и нафтол-AS-D-ацетата данные в отношении внутриклеточной локализации энзима получаются сходные, а интенсивность окраски с двумя первыми соединениями выше [14, 15].

Интенсивная реакция на «нейтральные эстеразы» ( -нафтилацетатэстеразу и -натфилбутиратэстеразу) и на кислую неспецифическую эстеразу, ингибирующаяся при добавлении в инкубационную среду фторида натрия (NaF) в концентрации 0,03 М (1,5 мг/мл), является цитохимическим маркером клеток, относящихся к системе мононуклеарных фагоцитов (монобластов, промоноцитов, моноцитов, гистиоцитов-макрофагов, эпителиоидных клеток).

Выявление активности неспецифической эстеразы реакцией одновременного азосочетания по Pearse (1960) в модификации Loffler (1961) [14]

1. Фиксация мазков крови и отпечатков кроветворных органов в парах 10% раствора формалина в течение 3 мин.

2. Обезжиривание в эфире в течение 20 с.

3. Нанесение на мазки на 1 ч при комнатной температуре профильтрованной смеси следующего состава:

-нафтилацетат натрия (растворенный в 0,2 мл химически чистого ацетона) 5 мг
0,1 М трис-HCl буфер рН 7,8 20 мл
прочный красный TР (5-хлор-о-толуидин) 25 мг

4. Промывание мазков, высушивание и микроскопирование.

Результат. В участках ферментативной активности в цитоплазме клеток выявляются гранулы красного цвета.
Контрольные мазки инкубируют в среде, из которой исключен субстрат, а также в смеси, к которой добавляется фторид натрия из расчета 1,5 мг на 1 мл раствора.

Выявление активности кислой a‑нафтилацетатэстеразы методом одновременного азосочетания по Mueller и соавторов [16]

2. Инкубация мазков в течение 3 ч при комнатной температуре в смеси следующего состава:

-нафтилацетат натрия (растворенный в 0,2 мл химически чистого ацетона) 10 мг
0,067 М фосфатный буфер рН 6,5 40 мл
гексаазотированный парарозанилин 2 мл.
Смесь доводится до рН 5,8 с помощью 2 н. NaOH.

Результат. В участках ферментативной активности в цитоплазме клеток обнаруживается конечный продукт реакции красно-коричневого цвета.
Хлорацетатэстераза. При применении в качестве субстрата нафтол-AS-D-хлорацетата в клетках обнаруживается активность фермента, условно называемого ХАЭ. Последний является маркером нейтрофильных лейкоцитов различной степени зрелости и тучных клеток.

Выявление активности хлорацетатэстеразы методом одновременного азосочетания по Moloney, McPherson, Fliegelman (1960) [17]

2. Инкубация мазков в течение 1,5 ч при комнатной температуре в смеси следующего состава:

нафтол-AS-D-хлорацетат (растворенный в 0,2 мл химически чистого ацетона) 5 мг
0,1 М трис-HCl буфер, pH 7,8 20 мл
прочный синий РР (диазониевая соль 4-бензоил-2,5-метоксианилина) 25 мг.

3. Промывание мазков в воде и высушивание.

Результат. Активность ХАЭ определяется в виде гранул синего цвета в цитоплазме клеток.

Контрольные мазки инкубируются в среде, из которой исключен субстрат реакции, или в смеси, в которой нафтол-AS-D-хлорацетат заменен эфирами уксусной кислоты и других замещенных нафтолов.

-Глюкуронидаза (КФ 3.2.1.31) вызывает гидролитическое расщепление гликозидных связей в глюкуронидах. Относится к числу ферментов, локализованных в лизосомах. Метод азосочетания, предложенный для выявления активности -глюкуронидазы в кроветворных клетках основан на связывании освобождающихся при ферментативном гидролизе нафтол-AS-BI- -D-глюкуронида нафтола-AS-BI солью гексазония с образованием нерастворимого соединения красного цвета [18].

Выявление b-глюкуронидазы методом одновременного азосочетания по Hayashi и соавторов [19] и Lorbacher и соавторов (1967) [4]

2. Инкубация мазков при 37 °С в течение 60 мин в смеси следующего состава:

основной раствор субстрата 10 мл
гексаазотированный парарозанилин 0,6 мл.

Довести рН раствора до 5,2–5,4 с помощью 1 н. NaOH, добавить дистиллированную воду до конечного объема 20 мл.

Приготовление основного раствора субстрата: 28 мг нафтол-AS-BI- -D-глюкуроновой кислоты растворяют в 1,2 мл 0,05 М гидрокарбоната натрия и доводят с помощью 0,2 М ацетатного буфера рН 5,0 до объема 100 мл.

3. Промывание мазков дистиллированной водой, докрашивание ядер 2% раствором метилового зеленого, промывание и высушивание.
Результат. В местах локализации -глюкуронидазы обнаруживается диффузное или гранулярное окрашивание цитоплазмы клеток крови и костного мозга. Подобно реакции на КФ, цитохимическое определение активности -глюкуронидазы может быть использовано для характеристики Т-клеточных лимфопролиферативных заболеваний.

PAS-реакция. В качестве методической основы для цитохимического выявления гликогена в клетках крови, костного мозга и лимфатических узлов применяется так называемая PAS-, или ШИК-реакция, в сокращенном наименовании которой отражено название реактивов, с помощью которых выявляется внутриклеточная локализация полисахарида (Periodic Acid-Schiff reaction или реакция с реактивом Шиффа — йодной кислотой). Окрашенный продукт реакции образуется в результате взаимодействия реактива Шиффа с диальдегидом, возникающим при разрыве С-С-связей в структурах, содержащих две смежные гликолевые группы в положении 1,2 (СНОН-СНОН), окисляющиеся под влиянием перйодной кислоты.

Выявление гликогена с помощью PAS‑реакции по McManus (1956) и Hotchkiss (1948) [5]

1. Фиксация свежеприготовленных и высушенных на воздухе мазков крови, костного мозга и отпечатков лимфатических узлов в парах 10% раствора нейтрального формалина в течение 3 мин.
2. Погружение мазков на 10 мин в 1% раствор перйодной кислоты.
3. Промывание в дистиллированной воде и высушивание.
4. Помещение препаратов в реактив Шиффа на 30 мин при комнатной температуре в темноте.

Приготовление реактива Шиффа:

Вариант I. 1 г фуксина заливают 200 мл кипящей дистиллированной воды и охлаждают до 50 °С, фильтруют и добавляют 40 мл 1 н. соляной кислоты; охлаждают до 25 °С и добавляют 2 г метабисульфита натрия или калия. Раствор хранят в холодильнике.

Вариант II. 1 г фуксина растворяют при осторожном помешивании в 200 мл дважды кипящей дистиллированной воды, поддерживая слабое кипение раствора в течение 5 мин, охлаждают до 18–20 °С, добавляют 2 г метабисульфита натрия или калия и интенсивно встряхивают смесь в течение 3 мин, добавляют 20 мл соляной кислоты, закрывают герметично пробкой и оставляют в темноте при 4–6 °С. В течение 6–12 ч раствор обесцвечивается.

Качество основного фуксина является решающим: необходимо пользоваться только высокоочищенными марками реактива с пометкой «фуксин основной для фуксинсернистой кислоты».

5. Промывание мазков в проточной воде в течение 20 мин и высушивание.

Результат. В местах локализации PAS-положительных веществ в цитоплазме клеток наблюдается диффузное или гранулярное пурпурно-красное окрашивание.

Иммуноцитологические методы

Основная задача, решаемая при помощи иммуноцитологических методов в современной онкогематологии, — определение спектра антигенов поверхностных мембран, цитоплазмы и ядер клеток, относящихся к патологическому клону, т.е. их иммунофенотипа. Главное условие для успешного выполнения этой задачи — правильный подбор моноклональных антител (мкАТ) в диагностическую панель, которая бы позволила при минимальных затратах точно определить гистогенез и степень дифференцированности тестируемых клеток, а также выбор адекватного иммуноцитохимического метода с учетом специфики исследуемого материала. В настоящее время известно около 200 кластеров дифференцировочных, линейных, активационных антигенов и еще больше мкАТ для их распознавания [20]. В соответствующих разделах руководства достаточно полно освещены вопросы, касающиеся известных к настоящему времени иммунофенотипических признаков клеток различного генеза, которые составляют опухолевый субстрат при лейкозах, лимфомах и других опухолевых заболеваниях. В данном разделе мы подробнее рассмотрим различные иммуноцитохимические методы и способы их применения.

Следует отметить, что в основе всех иммуноферментных методов исследования лежит использование меченых антител, при этом в качестве метки могут выступать флуоресцентные красители (флуоресцентные методы), ферменты (иммуноферментные цитохимические методы), коллоидальное золото (преимущественно применяется в электронной иммуногистохимии), радиоактивные изотопы (радиоиммунный анализ). Эффективность иммуноферментной цитохимической реакции в равной степени обусловливается высокой активностью антител, чистотой и активностью ферментного препарата, используемого в качестве метки специфических антител, низкой растворимостью конечных продуктов энзимоцитохимической реакции. Для конъюгации с антителами чаще всего применяют МПО, ЩФ и практически отсутствующую в тканях человека -галактозидазу [18–20]. Наиболее широкое распространение получили два первых фермента благодаря тому, что они достаточно стабильны, выпускаются в чистом виде, для определения их активности существуют легко воспроизводимые современные цитохимические методы, позволяющие использовать широкий спектр доступных хромогенных субстратов. По тому, какой фермент используется в качестве метки, методы называют иммунопероксидазными, иммунощелочно-фосфатазными, иммуно- -галактозидазными.

По способу связывания с тканевым антигеном различают прямые, непрямые и «сэндвич» методы. К числу последних принадлежат известные РАР (peroxidase-anti-peroxidase) [20–23] и АРААР (alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase) методы (в русской интерпретации ПАП и ЩФАЩФ) [24–26]. На заключительном этапе иммунологической реакции в них используются комплексы, состоящие из мкАТ к ферменту и самого фермента (иммунный комплекс МПО — мкАТ к пероксидазе в ПАП-методе или ЩФ — мкАТ к ЩФ в ЩФАЩФ-методе). Несколько отличается по принципу связывания тканевого антигена с антителом, несущим ферментную метку, авидин-биотиновый метод (АВС или АБК), в котором используется «мостик» из меченных биотином антимышиных антител и авидина, соединенного с ферментом [27, 28]. Метод основан на высоком химическом сродстве гликопротеина яичного белка авидина к низкомолекулярному витамину из яичного желтка — биотину и отличается большой чувствительностью. В процессе иммуноцитохимической реакции образуется прочный авидин-биотиновый комплекс, несущий достаточное для его визуализации количество метки-фермента.

Принципы прямого и непрямого вариантов иммуноцитохимических методов соответствуют аналогичным вариантам иммунофлуоресцентного метода, за исключением того, что на завершающем этапе для проявления ферментной метки нужно проводить энзимогистохимическую реакцию [29, 30].

При прямом методе используют мкАТ или моноспецифические сыворотки, меченные ферментом. Иммунологическую реакцию связывания антител с клеточными антигенами, а затем и цитохимическую реакцию определения активности фермента, как правило, проводят в суспензии клеток, и цитологические препараты готовят из уже окрашенных клеток. Это наиболее простой метод, однако в иммуноцитохимии практически не применяется, поскольку имеет ряд недостатков. Прежде всего — это необходимость получения для каждого определяемого антигена конъюгированных с ферментом антител, а также недостаточно интенсивное мечение хорошо распластанных клеток в цитологических препаратах. Кроме того, инкубирование суспензии клеток с антителами часто приводит к смещению антигенов к одному из полюсов клетки с образованием «кэп’ов» («шапочек»), а иногда и к их слущиванию при последующих процедурах отмывания клеток [26]. Прямой метод с использованием мкАТ, меченных флуоресцентными красителями, с успехом применяют в проточной цитофлуориметрии.

Непрямой метод иммуноцитохимического анализа лишен многих недостатков прямого метода. Его проводят в два этапа: на первом происходит связывание немеченых мкАТ с искомым антигеном, а для выявления этой связи на втором этапе используют антитела, конъюгированные с ферментом. При этом антитела второго слоя должны быть специфичны к иммуноглобулинам того вида животных, от которых получены первые антитела. Поскольку в настоящее время в основном используют мкАТ, получаемые от мышей, соответственно антитела второго слоя должны быть направлены против иммуноглобулинов мыши. В непрямом варианте иммуноферментного метода с каждой молекулой антител связываются две молекулы меченых антител второго слоя. Таким образом, при одном и том же количестве антигена в местах связывания обнаруживается большее количество интенсивно окрашенных конечных продуктов ферментативной реакции [20, 29, 30]. Этот метод более чувствительный, чем прямой, и достаточно широко применяется, в частности, в технике ELISA для идентификации антител в сыворотке крови пациентов с различными инфекционными и неинфекционными заболеваниями. Однако он мало подходит для выявления «слабых» антигенов и антигенов, представленных на поверхностной мембране клетки в небольших количествах. Для усиления специфического окрашивания мест связывания антигена на поверхности клетки при непрямом иммунопероксидазном методе предложены различные способы: введение на заключительном этапе реакции в раствор хромогенного субстрата солей тяжелых металлов, в частности осмия, или проведение повторной инкубации препаратов с мечеными антителами, но направленными против иммуноглобулинов животных, от которых получена вторая сыворотка. Непрямой метод в настоящее время редко применяется для иммунофенотипирования лейкоцитов, значительно шире используются «сэндвич»-методы (ПАП и ЩФАЩФ) и авидин-биотиновые (АВС) методы исследования.

Процедура иммуноцитохимических ПАП- и ЩФАЩФ-методов предусматривает выполнение трех последовательных этапов: инкубацию с мкАТ (мышиные иммуноглобулины) на первом этапе, с антисывороткой против иммуноглобулинов мыши на втором и с комплексом, состоящим из мышиных мкАТ к ферменту (МПО в ПАП-комплексе и ЩФ в ЩФАЩФ-комплексе) и самого фермента, — на третьем этапе. При этом антитела против иммуноглобулинов мыши (сыворотка второго этапа) берут в избыточном количестве для увеличения свободных мест связывания с иммуноглобулинами мыши первого и третьего этапов. Завершает процедуру цитохимическая реакция определения активности фермента, входящего в состав комплекса — МПО в ПАП-варианте или ЩФ в ЩФАЩФ-варианте иммуноцитохимического «сэндвич»-метода.

Использование мкАТ ПАП- или ЩФАЩФ-комплексов на несколько порядков повышает чувствительность иммуноцитохимических методов по сравнению с традиционным иммунофлуоресцентным. В составе стабильного циклического комплекса на две молекулы антитела приходится три молекулы фермента и, поскольку они связаны не химически, а как антиген с антителом, не утрачивается способность связываться с антителами второго слоя через F(ab’)2-фрагменты Ig и не ингибируется активность фермента. Таким образом, создается повышенная концентрация ферментной метки в местах связывания первичного (моноклонального) антитела с выявляемым антигеном и становится возможным обнаружение антигенных структур, плотность которых на поверхностной мембране клетки недостаточно велика. Это позволяет использовать антитела в высоких разведениях и добиться уменьшения неспецифического окрашивания. При необходимости интенсивность специфического окрашивания можно усилить, повторяя второй и третий этапы иммунологической реакции до начала цитохимической реакции [31, 32].

Метод с использованием авидин-биотинового комплекса (АВС) не уступает ПАП- и ЩФАЩФ-методу по чувствительности и интенсивности окрашивания мест специфического связывания тканевого антигена с мкАТ к нему. Технически процедура его выполнения аналогична описанной выше для ПАП- и ЩФАЩФ-методов с той лишь разницей, что на втором этапе реакции используются антитела к иммуноглобулинам мыши, конъюгированные с биотином, а на третьем — авидин, меченный ферментом (МПО или ЩФ) [27, 28].

Характерной особенностью третичной структуры молекулы авидина (гликопротеин с мол. массой 68 кД) является наличие четырех гидрофобных «впадин», которые служат местом специфического связывания молекул биотина — водорастворимого витамина Н, содержащегося в яичном желтке и других тканях (печени, почках, кишечнике, поджелудочной железе). Благодаря высокой степени сродства биотина к авидину любое вещество, конъюгированное с биотином, можно обнаружить по его взаимодействию с авидином. При биотинилировании иммуноглобулинов или их F(ab’)2-фрагментов происходит связывание карбоксильной группы биотина с Nh3-группами белка, при этом биологические свойства конъюгированного компонента полностью сохраняются

К недостаткам АВС-метода можно отнести возможность связывания авидина с эндогенным биотином при исследовании некоторых органов и тканей (почками, печенью), а также окрашивание гранул тучных клеток, связывающих авидин, что приводит к ложноположительным результатам иммуноцитохимической реакции. Однако этот недостаток легко устраняется, если использовать вместо авидина его аналог — стрептавидин (белок с мол. массой 60 кД, полученный из Streptomyces avidinii). Подобно авидину он также является тетрамером, состоящим из четырех идентичных субъединиц, каждая из которых содержит высокоаффинные сайты связывания биотина. В отличие от авидина в нем нет олигосахаридных остатков, которые могут взаимодействовать с пектиноподобными белками клеток и тканей и обусловливать неспецифическое окрашивание. Кроме того, изоэлектрическая точка авидина 10,5, а стрептавидина близка к нейтральной, что исключает неспецифическое связывание стрептавидина с цитоплазматическими или ядерными мембранами клеток при рН 7,4, который поддерживается на всех этапах проведения иммуноцитохимической реакции [27–30, 32].

Как уже отмечалось выше, выбор фермента — метки антител во многом зависит от типа ткани (клеток), в которой предстоит проводить иммуноцитохимическую реакцию. Иммунные комплексы с МПО являются оптимальными для работы с отмытыми клетками лимфатических узлов, определения субпопуляций лимфоцитов крови, изучения иммунофенотипа клеток при лимфоидных формах лейкозов [23]. Однако для работы с мазками крови и костного мозга, для определения иммунофенотипа клеток миелоидного генеза, в том числе при острых лейкозах, когда клетки лишены признаков линейной принадлежности либо содержат эндогенную МПО в качестве метки антител третьего слоя, предпочтительнее использовать ЩФ. Для этих целей больше подходит ЩФАЩФ-метод и комплекс авидин — ЩФ, вместо комплекса авидин — МПО [25, 33, 34].

Применение ЩФ в качестве метки антител началось с непрямого иммуноферментного метода для выявления двух разных антигенов в одном образце гемопоэтической ткани [35], причем один из антигенов метился с помощью ПАП-комплекса, а другой — конъюгатом антимышиных иммуноглобулинов со ЩФ. Продукт цитохимической реакции определения активности ЩФ может быть красным или синим в зависимости от используемого в субстратной смеси красителя, что позволяет получить хороший контраст с коричневым продуктом иммунопероксидазной реакции. Оптимальный уровень рН для выявления активности ЩФ из кишечника теленка, которая обычно используется в качестве метки антител, находится в пределах 7,6–8,0. При этих значениях рН наиболее эффективен левамизол, применяемый в качестве ингибитора эндогенной ЩФ гранулоцитов крови. При более низких значениях рН обнаруживается эндогенная фосфатазная активность в макрофагах, не ингибируемая левамизолом [24, 26, 36].

Преимущества, которые получает исследователь, анализируя антигенную структуру клеток непосредственно в мазках периферической крови, костного мозга, лейкоконцентратов венозной крови, экссудатов из серозных полостей, очевидны. Помимо возможности изучения иммунофенотипа клеток, можно определить их морфологические признаки или обнаружить редкие антигенположительные клетки, несвойственные данному типу ткани (например, раковые клетки в мазках костного мозга или лимфатических узлов).

Подготовка цитологических препаратов для проведения иммунофенотипирования, условия их хранения и фиксации — важные моменты для успешного проведения иммуноцитохимической реакции [26, 32, 34, 37]. Ниже мы подробно опишем технику приготовления цитологических препаратов типа «высушенных капель» из суспензии отмытых клеток крови, костного мозга, лимфатических узлов и других тканей, а также условия для успешного проведения иммуноцитохимических исследований.

Цитологические препараты

Мазки из клеток цельной крови или костного мозга готовят обычным способом при помощи распределительного стекла на тонких, хорошо обезжиренных предметных стеклах. Мазки должны быть достаточно тонкими и высушенными на воздухе в течение не менее 1 ч при комнатной температуре.
Цитологические препараты в виде высушенных капель готовят из суспензии клеток, выделенных в градиенте плотности фиколл-верографина (плотность 1,076–1,078) из гепаринизированной венозной крови или костного мозга и отмытых в забуференном изотоническом растворе (ЗИР) натрия хлорида (рН 7,2–7,4). В очерченные на предметных стеклах участки вносят по 25–30 мкл суспензии клеток в концентрации 2–4 млн/мл, выдерживают 20 мин в строго горизонтальном положении во влажной камере при комнатной температуре (18–22 °С), затем аккуратно сливают излишки раствора на фильтровальную бумагу и быстро высушивают образовавшийся слой клеток при помощи вентилятора [32].

Хранение

Антигенные свойства клеток в препаратах сохраняются в неизменном виде, если нефиксированные цитологические препараты в виде высушенных капель хранятся завернутыми в фильтровальную бумагу не более 1 нед при температуре 4 °С, а в виде мазков — несколько месяцев при температуре –20 °С завернутыми в тонкую алюминиевую фольгу.

Фиксация

Цитологические препараты из отмытых клеток, завернутые в фильтровальную бумагу, достают из холодильника в день проведения иммуноцитохимической реакции и доводят до комнатной температуры в течение 20–30 мин, не разворачивая. Когда мазки достаточно согрелись, их вынимают из бумаги и помещают на 5 мин в камеру для фиксации, наполненную парами 10% раствора формалина (100% раствор формалина разводят 1:10 дистиллированной водой и пропитывают им несколько слоев фильтровальной бумаги, которую затем укладывают на дно герметично закрывающейся камеры; через несколько минут в камеру с парами формалина можно помещать препараты для фиксации).

Мазки из цельной крови или костного мозга фиксируют в растворе забуференного формол-ацетона [26], который готовят следующим образом: 128 мг Nah3PO4.2h3O и 12 мг Na2HPO4.12h3O растворяют в 30 мл дистиллированной воды, добавляют 45 мл химически чистого ацетона и 25 мл 40% раствора нейтрального формальдегида. Доводят смесь до рН 6,6 под контролем рН-метра концентрированным раствором NaOH (смесь хранят при 4 °С в посуде с притертой пробкой не больше 1 мес). Мазки вынимают из морозильной камеры непосредственно перед фиксацией, освобождают от алюминиевой фольги и немедленно заливают фиксатором на 40 с, после чего фиксатор сливают, а мазки сразу погружают в отмывающий раствор, состоящий из 94 мл 0,9% раствора NaCl и 6 мл 0,1 М фосфатного буфера (рН 7,2–7,4). Этот ЗИР используется и на других этапах иммуногистохимической реакции, поэтому его готовят в количестве не менее 200–300 мл в день проведения иммунофенотипирования или накануне и хранят в холодильнике.

Мазки вынимают из ЗИР, очерчивают на них участки, куда затем будут наносить антитела, подписывают их, а участок вокруг просушивают фильтровальной бумагой. Участок на стекле, где будет проходить иммуноцитохимическая реакция, должен оставаться влажным на протяжении всех циклов инкубации с антителами, но без лишней жидкости, чтобы не допустить переразведения наносимых на этот участок специфических антисывороток и мкАТ.

Техника проведения иммуноцитохимических методов

Перечислим основные правила, которые необходимо соблюдать при выполнении иммуноцитохимических реакций:

все специфические антисыворотки и мкАТ наносят в определенный участок на стекле с клетками, очерченный алмазным грифелем по лицевой стороне мазка или специальной ручкой по стеклу — на оборотной стороне;
фиксацию препаратов проводят непосредственно перед началом иммуноцитохимической реакции; выбор фиксатора обусловлен типом цитологических препаратов: отмытые клетки фиксируют в парах формалина, мазки — в забуференном формол-ацетоне;
все инкубационные циклы, предусмотренные в иммуноцитохимической реакции, проводят во влажной камере при комнатной температуре;
после инкубации с каждым очередным реагентом стекла отмывают 2–3 раза в ЗИР (меняя его) путем погружения их в стаканчики с этим раствором; растворы должны быть свежеприготовленными, загрязнение их бактериями недопустимо; после каждого реагента отмывающий раствор в стаканчике необходимо менять;
избыток влаги после отмывок удаляют со стекла фильтровальной бумагой, аккуратно промакивая и не касаясь при этом отмеченного участка;
в очерченной зоне клетки должны постоянно оставаться слегка влажными, но без лишней жидкости;
специфические антисыворотки и мкАТ используют в рекомендованных производителями рабочих разведениях либо подбирают эмпирически на положительных контрольных препаратах;
цитохимические реакции по выявлению активности фермента, входящего в состав используемого иммунного комплекса (чаще всего МПО или ЩФ), проводят сразу после окончания иммунологической реакции;
докраска ядер осуществляется специальными ядерными красителями, контрастирующими по цвету с продуктами цитохимической реакции; лучше всего для этих целей подходит 0,1% раствор метилового зеленого;
после выполнения иммуноцитохимической реакции и докраски ядер готовые препараты, которые будут затем многократно просматриваться в иммерсионной светооптической системе, можно накрыть покровными стеклами, заключив в глицерин-желатин или концентрированный раствор фруктозы.

Непрямой иммуноцитохимический метод чаще используют при работе с отмытыми клетками (препараты типа «высушенной капли»), процедура проведения следующая:

1. Согретые до комнатной температуры предметные стекла с нанесенными на них клетками фиксируют в течение 5 мин в парах формалина, укладывают горизонтально в специально подготовленный бокс (влажную камеру) и наносят моноспецифические сыворотки или мкАТ в рабочем разведении на очерченные участки. Инкубируют 1 ч при комнатной температуре.

2. Аккуратно стряхивают антитела первого слоя на фильтровальную бумагу и промывают стекла, слегка покачивая, поочередно в двух стаканчиках с ЗИР. Просушивают фильтровальной бумагой участки стекла вокруг очерченной зоны, не задевая ее, и наносят антитела второго слоя — специфические антитела против иммуноглобулинов мыши, меченные МПО или ЩФ. Если на первом этапе реакции использовали кроличью моноспецифическую сыворотку, а не мышиные мкАТ, то на втором следует применять антитела козы или осла против иммуноглобулинов кролика, меченные ферментом. Продолжительность второго этапа инкубации — 1 ч.

3. Стряхивают антитела второго слоя, промывают и просушивают стекла, как описано выше. Выполняют цитохимическую реакцию определения активности фермента, который использовался в качестве метки антител. Для этого наносят на отмеченные участки раствор, содержащий хромогенный субстрат, инкубируют 10–20 мин, смывают дистиллированной водой, докрашивают ядра клеток в течение 1 мин 0,1% раствором метилового зеленого, снова промывают стекла в воде и высушивают на воздухе. Анализируют в иммерсионной системе светооптического микроскопа. При использовании в качестве метки антител МПО, а в качестве хромогенного субстрата 3,3’-диаминобензидина (ДАБ) в антиген-положительных клетках будет наблюдаться темно-коричневое окрашивание. Если меткой антител служила ЩФ, цвет продукта цитохимической реакции будет зависеть от выбранного красителя: при использовании прочного синего PP конечный продукт реакции будет темно-синим, прочного красного TR и гексаазотированного парарозанилина — красным.

ПАП, ЩФАЩФ и авидин-биотиновый методы, которые обладают более высокой чувствительностью, лучше подходят для выявления антигенной структуры клеток в мазках и цитоцентрифужных препаратах. При использовании ПАП-метода для работы с мазками крови и костного мозга существует необходимость в предварительной обработке мазков с целью ингибирования активности эндогенной МПО и неспецифического окрашивания эритроцитов раствором, содержащим ДАБ [38]. При изучении иммунофенотипических особенностей бластных клеток при острых лейкозах мы отдаем предпочтение методам с использованием ЩФ в качестве метки антител — ЩФАЩФ и АВС [32, 39]. Техника выполнения всех трех методов (ПАП, ЩФАЩФ И АВС) совпадает, за исключением завершающей процедуры — цитохимического определения активности фермента — метки антител последнего этапа. Рассмотрим подробнее эту процедуру.

1. Цитологические препараты после фиксации помещают в горизонтальном положении во влажную камеру и наносят 20–50 мкл мкАТ в отмеченные участки. Инкубировать в течение 1 ч при комнатной температуре (18–22 °С).

2. Осторожно стряхивают антитела первого этапа и промывают стекла в ЗИР (меняя его 3 раза), просушивают свободные от клеток участки стекла, стараясь не задеть отмеченные зоны реакции. Наносят 20–50 мкл немеченой (при выполнении ПАП и ЩФАЩФ) кроличьей (козьей, ослиной) сыворотки против иммуноглобулинов мышей (связующая сыворотка) в избыточном титре. При выполнении АВС-метода на этом этапе используют сыворотку против иммуноглобулинов мышей, конъюгированную с биотином. Инкубируют 30 мин.

3. Стряхивают антитела второго этапа, отмывают препараты свежим ЗИР (2–3 раза меняя его), удаляют фильтровальной бумагой излишек влаги со стекол и наносят в зоны реакции по 20–50 мкл сыворотки третьего этапа:

мышиные мкАТ к МПО, соединенные с МПО (ПАП-комплекс), в рабочем разведении, если выполняется ПАП-метод;
мышиные мкАТ к ЩФ, соединенные со ЩФ (ЩФАЩФ-комплекс), если выполняется ЩФАЩ Ф-метод;
стрептавидин, коъюгированный с МПО или со ЩФ, если выполняется АВС-метод.

Инкубируют 1 ч во влажной камере при комнатной температуре.

4. Отмывают препараты, как описано выше, проводят цитохимическую реакцию определения активности:

МПО, если выполняли ПАП-метод или иммунопероксидазный АВС-метод;
ЩФ, если выполняли ЩФАЩФ-метод или щелочно-фосфатазный АВС-метод.

Ядра клеток докрашивают метиловым зеленым или гематоксилином Майера, высушивают на воздухе, при необходимости заключают в глицерин, микроскопируют в иммерсионной светооптической системе.

Цитохимические методы определения активности ферментов в составе иммунных комплексов

Определение активности пероксидазы из хрена

1. Модифицированный метод Graham, Karnovsky (1966) с использованием ДАБ (3,3’-диаминобензидина солянокислого) [32]
Состав инкубационной смеси:

3,3’-диаминобензидина тетрахлорид 5 мг
0,1 М фосфатный буфер, рН 7,2-7,4 10 мл
3% раствор перекиси водорода 0,02 мл

Инкубируют препараты 10 мин в свежеприготовленной смеси, промывают дистиллированной водой, докрашивают ядра 0,1% водным раствором метилового зеленого (1–2 мин) или гематоксилином Майера. Снова промывают препараты водой и высушивают. Продукт реакции коричневого цвета определяется в местах локализации антигена. В спиртах не растворяется.

2. Метод с использованием 3-амино-9-этилкарбазола (Graham, 1965) [32]

Состав инкубационной смеси:

3-амино-9-этилкарбазол 2 мг
диметилформамид или ацетон 0,5 мл
0,05 М ацетатный буфер, рН 5,0 9,5 мл
3% раствор перекиси водорода 0,02 мл

Препараты инкубируют 10 мин при комнатной температуре, смывают дистиллированной водой и докрашивают клетки 0,1% водным раствором метилового зеленого. Продукт реакции красного цвета, растворим в спиртах.

3. Метод с использованием 4-хлор-1-нафтола (Nakane, 1968) [32]

Состав инкубационной смеси:

4-хлор-1-нафтол 20 мг
абсолютный спирт этиловый 0,02 мл
0,05 М трис-HCl-буфер, рН 7,6 50 мл
3% раствор перекиси водорода 7,5 мкл

Инкубируют препараты при комнатной температуре 10 мин, промывают дистиллированной водой, докрашивают ядра нейтральным красным или кармалем. Продукт реакции темно-синего цвета, растворим в спиртах.

Способы ингибирования эндогенной миелопероксидазы

1 способ. Препараты фиксируют в свежеприготовленной смеси, состоящей из 200 мл абсолютного метанола и 50 мл 32% раствора перекиси водорода. Отмывают стекла в ЗИР (3 раза меняя его) в течение 10 мин. Процедуру проводят вместо предложенных выше способов фиксации до начала иммуноцитохимической реакции. Хорошо сохраняется морфология клеток, однако не все антигенные детерминанты остаются неизменными при жесткой фиксации в метаноле.
2 способ. Зафиксированные в парах формалина или в формол-ацетоне препараты последовательно обрабатывают 0,01% водным раствором перйодной кислоты и 0,1% водным раствором борогидрата натрия (по 10 мин при комнатной температуре). Затем препараты промывают дистиллированной водой и погружают на 10 мин в отмывающий раствор (ЗИР) до начала иммуноцитохимической реакции. Способ эффективно снижает активность эндогенной МПО в нейтрофильных лейкоцитах и практически не изменяет ее в эозинофилах.

3 способ. Зафиксированные препараты в течение 10 мин инкубируют в растворе, содержащем 0,3% Н2О2 в 0,1% растворе азида натрия (NaN3). Затем ингибитор сливают, отмывают препараты в ЗИР (3 раза меняя его) перед началом иммуноцитохимической реакции. Относительно мягкий и эффективный способ, позволяющий без ущерба для морфологических и антигенных свойств клетки снижать активность эндогенной МПО в большинстве клеток гранулоцитарного ростка кроветворения.

Определение активности щелочной фосфатазы из кишечника теленка

1. Реакция азосочетания с использованием прочного красного TR

Состав инкубационной смеси:

Нафтол-AS-MX-фосфат 2 мг
диметилформамид или ацетон 0,2 мл
0,1 М трис-HCl-буфер, рН 8,2 9,8 мл
1 М раствор левамизола 0,01 мл
прочный красный TR 10 мг

Вначале растворяют нафтол-AS-MX-фосфат в нескольких каплях ацетона или диметилформамида и сразу заливают нужным количеством трис-буфера. При необходимости ингибирования активности эндогенной ЩФ добавляют левамизол. Этот раствор достаточно стабилен и может храниться при температуре 4 °С несколько недель. Прочный красный вносят в раствор субстрата непосредственно перед использованием реактива.

Инкубируют препараты 20 мин при комнатной температуре. Раствор хромогенного субстрата смывают дистиллированной водой, докрашивают ядра клеток 0,1% водным раствором метилового зеленого 1–2 мин, смывают краситель водой и высушивают препараты на воздухе. Продукт реакции красного цвета, растворим в спиртах.

2. Реакция с использованием нового фуксина (гексаазотированного парарозанилина)

Состав инкубационной смеси:

Нафтол-AS-BI-фосфат 5 мг
диметилформамид (или ацетон) 0,2 мл
0,05 М трис-HCl-буфер 10 мл
1 М раствор левамизола 0,01 мл
4% нитрит натрия (NaNO2) 0,05 мл
5% новый фуксин 0,02 мл

Растворяют нафтол-AS-BI-фосфат в нескольких каплях ацетона или диметилформамида, добавляют трис-буфер и левамизол. Этот раствор достаточно стабилен и может храниться при температуре 4 °С несколько недель. Отдельно смешивают свежеприготовленный 4% NaNO2 и 5% новый фуксин, встряхивают 20–30 с для получения гексаазотированного парарозанилина. Непосредственно перед употреблением добавляют 75 мкл парарозанилина к раствору субстрата, смесь тщательно перемешивают и наносят на стекла на 20 мин. Затем инкубационную смесь смывают дистиллированной водой, докрашивают ядра клеток метиловым зеленым, снова промывают препараты и высушивают их на воздухе. Продукт реакции красно-малинового цвета, растворим в спиртах.

Литература

1. Li C-Y, Yam LT. Cytochemistry and immunocytochemistry in hematologic diagnoses. Hematol Oncol Clin North Am 1994; 8: 665–681.
2. General Haematology Task Force of the British Committee for Standards in Haematology. The role of cytology, cytochemistry, immunophenotyping and cytogenetic analysis in the diagnosis of haematological neoplasms. Clin Lab Haematol 1996; 18: 231–236.
3. Глузман ДФ, Абраменко ИВ, Скляренко ЛМ, Надгорная ВА. Лабораторная диагностика онкогематологических заболеваний. Киев: Морион, 1998. 336 с.
4. Бутенко ЗА, Глузман ДФ, Зак КП и др. Цитохимия и электронная микроскопия клеток крови и кроветворных органов. Киев: Наук думка, 1974. 248 с.
5. Глузман ДФ. Диагностическая цитохимия гемобластозов. Киев: Наук думка, 1978. 216 с.
6. Hayhoe FGJ, Quagino D. Haematological cytochemistry. London: Churchill Livingstone 1980; 367 p.
7. The Leukemic Cells. Ed. by D. Catovsky. Edinburgh, London: Churchil Livingstone 1991; 428 р.
8. Loffler H, Rastetter J. Atlas of clinical hematology. 5th ed. Berlin etc: Springer-Verlag 1999; 415 р.
9. Кисляк НС, Ленская РВ. Клетки крови у детей в норме и патологии. М: Медицина, 1978. 256 с.
10. Морозова ВТ. Лабораторная диагностика лейкозов. Л: Медицина, 1977. 151 с.
11. Shibata A, Bennett J, Castoldi GL et al. International Committee for Standartization in Haematology (ICSH). Clin Lab Haematol 1985; 7: 55.
12. Kaplow LS. A histochemical procedure for localizing and evaluating leukocyte alkaline phosphatase activity in smears of blood and bone marrow. Blood 1955; 10: 1023.
13. Goldberg ARF, Barka T. Acid phosphatase activity in human blood cells. Nature 1962; 195: 297.
14. Loffler H. Zytochemischer Nachweis von unspezifischer Esterase in Austrichen. Klin Wochenschr 1961; 39: 1220.
15. Schmalzl F, Braunsteiner H. Zur diagnose monozytaren Leukamien mit zytochemischen Methoden. Acta Haematol 1968; 40: 121.
16. Mueller J, Brundel RG, Buerki H et al. Nonspecific acid esterase activity: a criterion for differentiation of T and B lymphocytes in mouse lymph nodes. Eur J Immunol 1975; 5: 270.
17. Moloney WC, McPherson K, Fliegelman L. Esterase activity in leukocytes demonstrated by the use of naphthol AS-D chloracetate subsrate. J Histochem Cytochem 1960; 8: 200.
18. Lorbacher P, Yam LT, Mitus WJ. Cytochemical demonstration of beta-glucuronidase activity in blood and bone marrow cells. J Histochem Cytochem 1967; 15: 680.
19. Hayashi M, Nakajima Y, Fishman WH. The cytologic demonstration of beta-glucuronidase employing naphthol AS-BI glucuronide and hexazonium pararozanilin; a preliminary report. J Histochem Cytochem 1964; 12: 297.
20. Mason DY. The 7th Workshop and conference on human leucocyte differentiation antigens (HLDA7). Tissue antigens 2000; 55 Suppl 1: 5.
21. Lansdorp PM. Immunoperoxidase procedures to detect monoclonal antibodies against cell-surface antigens. Quantitation of binding and staining of individual cells. J Immunol Meth 1980; 39: 393.
22. Глузман ДФ, Надгорная ВА, Абраменко ИВ и др. Иммунопероксидазный метод определения антигенов поверхностных мембран нормальных и лейкозных клеток с использованием отечественных моноклональных антител. Эксперим онкология 1986; 8: 46.
23. Yam LT, English MC, Janckila AJ. Immunocytochemical characterization of human blood cells. Amer J Clin Pathol 1983; 80: 314.
24. Cordell JL, Falini B, Erber WN et al. Immunoenzymatic labelling of monoclonal antibodies using immune complexes of alkaline phosphatase and anti-alkaline phosphatase (APAAP complexes). J Histochem Cytochem 1984; 32: 219.
25. Davey FR, Erber WN, Gatter KC, Mason DY. Immunophenotyping of acute myeloid leukemia by immuno-alkaline phosphatase (APAAP) labeling with a panel of antibodies. Amer J Hematol 1987; 26: 157.
26. Mason DY, Erber WN. Immunocytochemical labelling of leukemia samples with monoclonal antibodies by the APAAP procedure. In: The leukemic cells. D. Catovsky ed. Edinburgh, London: Churchil Livingstone 1991; 196 p.
27. Hsu SM, Raine L, Fangler H. Use of avidin-biotin-peroxidase complex (ABC) in immunoperoxidase thechniques: a comparison between ABC and unlabeled antibody (PAP) procedures. J Histochem Cytochem 1981; 29: 577.
28. Sternberger LA, Sternberger NH. The unlabeled antibody method: comparison of peroxidase-antiperoxidase with avidin-biotin complex by a new method of quantification. J Histochem Cytochem 1986; 34: 599.
29. Полак Д, Ван Норден С. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы. М: Мир, 1987. 74 с.
30. Иммуноферментный анализ. Под ред. Нго ТТ, Ленхоффа Г М: Мир, 1988. 446 с.
31. Lansdorp PM, Van der Kwast TH, Zeijlemaker WP. Stepwise amplified immunoperoxidase (PAP) staining.1. Cellular morphology in relation to membrane markers. J Histochem Cytochem 1984; 32: 172.
32. Пинчук ВГ, Глузман ДФ, Надгорная ВА и др. Иммуноцитохимия и моноклональные антитела в онкогематологии. Киев: Наук думка, 1990. 231 с.
33. Erber WN, Pinching AJ, Mason DY. Immunocytochemical detection of T and B cell populations in routine blood smears. Lancet 1984; 1: 1042.
34. Lowenthal R, Marsden KA. A rapid, simple method for leukemia immunophenotyping, using air-dried blood and bone marrow smears. J Immunol Meth 1986; 93: 19.
35. Mason DY, Abdulaziz Z, Falini B. Double immunoenzymatic labeling. In: Immunocytochemistry. Practical application in pathology and biology. Polack JM ed Bristol: Wright 1983; 113 p.
36. Janckila AJ, Yam LT, Li C-Y. Immunoalkaline phosphatase cytochemistry. Technical consideration of endogenous phosphatase activity. Amer J Clin Pathol 1985; 84: 476.
37. Lowenthal R, Pralle H, Matter HP. A sensitive method for immunophenotyping stored leukemia and lymphoma cells with preservation of morphological detail. Pathology 1985; 17: 481.
38. Li C-G, Ziesmer SC, Lazcano-Villareal O. Use of azide and hydrogen peroxide as an inhibitor for endogenous peroxidase in the immunoperoxidase method. J Histochem Cytochem 1987; 35: 1457.
39. Мечетнер ЕБ, Глузман ДФ, Надгорная ВА, Розинова ЭН. Иммуноферментные цитохимические исследования в онкогематологии. Гематол трансфузиол 1989; 2: 57.
40. Huhn D. New diagnostic methods in oncology. Berlin-Heildelberg: Springer-Verlag 1998; 242 p.

Отвечая на вопросы… Из переписки

Очень часто обыкновенной диагностикой по фото, сканированием дело не заканчивается.
Потому как люди приходят разные — более подготовленные, что называется, «в теме», менее подготовленные, а бывает — совсем уж ни о чём себе «таком» ничего не знающие.
Объединяет их одно: они хотят знать больше , чем знают. Им интересно, что там, по ту сторону…
И часто вдогонку за стандартной диагностикой идут дополнительные вопросы, а потом ответы, и снова вопросы-ответы, и каждое сообщение тянет на цельный и законченный отдельный текст.
Я привожу здесь анонимные выдержки из некоторых сообщений с дополнительными вопросами — просто затем, чтобы предупредить вопросы других и не писать много раз об одном.
Итак…

Из переписки:

— «…Лена, скажите пожалуйста, у всех ли людей есть ангелы-хранители?»

Ангелы-Хранители по праву рождения даются всем.
В течении жизни при различных обстоятельствах к ним могут прибавиться дополнительные Хранители, защита Высших, или — защита предков, родового створа; или защита эгрегора, или тому подобное.

Ангел-Хранитель покидает человека в исключительных случаях — если жизнь человека противоречит Гармонии Вселенной; если он своими поступками, мыслями, действиями, убеждениями отказывается от Божественной Любви, Божественной энергии.
Если в нём появляются Внутренние установки, препятствующие течению и проникновению в его жизнь Божественной Абсолютной энергии — фактически, если он отказывается, не принимает её, живя в режиме деструкции и антагонизма, «вооружённой агрессии» к окружающему миру и Вселенной.
Для Вселенной он становится чужеродным объектом и она его отторгает, лишая своей защиты, усугубляя его жизнь и ускоряя конец.

На тонких уровнях это можно обнаружить критичным повышением уровня подсознательной скрытой агрессии и значительным снижением уровня Жизненной энергии. Да, собственно, и отсутствие Защиты тоже ощутимо.
На моей практике так было дважды — и оба раза люди возвращались к Гармонии, возвращали себе своих Ангелов.
Один был на грани жизни и смерти, у другого фактически на тот момент развалилась полностью судьба по всем параметрам.

Существует аналог Ангелов-Хранителей, равный им по силе защиты своего носителя — это Демоны-Хранители, своеобразные Ангелы-Хранители Божественного Земного типа.
Они даются, так же как и Ангелы-Хранители, по праву рождения ВСЕМ представителям Чёрной расы, а также некоторым представителям Жёлтой и Белой расы.

— Доброго дня)

По поводу заданных вами вопросов:

— Вы спрашиваете, каким образом может проявляться и развиваться энергия Преобразователей-Созидателей, и как это зависит от носителя — человека, в полевых структурах которого эти энергии Присутствуют?

В зависимости от того, насколько развит человек, кем он является, энергии могут проявляться по-разному. Вы, как представитель расы Индиго, по умолчанию являетесь уже высокочастоником (Индиго и условно «Зелёная» раса — это расы высокого уровня частот собственных вибраций), ваш уровень энергии Любви тоже высок — у вас она по 4 типу (виду). Кроме всего, вы обладаете непроявленными способностями, которые можно отнести к экстрасенсорным. Это свидетельствует о высоком уровне развития вас, как носителя Высших энергий, в целом.

И представьте себе представителя белой расы, со средним уровнем собственных частот вибраций (до 247-247,5 ед.) и энергиями Любви среднего, 2-3 типа (вида), коих подавляющее большинство. Но у которого в полях тот же вид энергии Высшего типа — Преобразователь-Созидатель.

Естественным будет и различное проявление энергии Преобразования-Созидания. У вас оно будет направлено большей частью на окружающий мир, на преобразование и созидание его процессов, на окружающих вас людей.

У носителя со средними частотами — на круг своих проблем, свой мир, свои интересы, свой круг близких людей. Они в первую очередь меняют жизнь вокруг себя, и производят изменения в себе самих. Что тоже ценно.

У вас, как у всех Индиго, выше и объёмнее сонастройка с тонкими полями — вы быстрее и в большем объёме можете получать информацию, быстрее её преобразовываете, адекватнее реагируете, шире используете. Ваш ум, ваша сущность настроены на Преобразование и Созидание окружающего мира, процессов, сообществ.

Люди, имеющие в полевых структурах энергии Преобразователей-Созидателей и одновременно относящиеся к высокочастотникам, помогают окружающим «включать мозги» во всех смыслах, проявиться.

Иногда одного их присутствия в команде, компании достаточно для того, чтобы активизировать и проявить в окружающих их профессиональные качества и знания максимальным образом — именно это я имела ввиду, когда писала, что ваша направленность — организатор, менеджер, руководитель среднего и высшего звена, управляющий во всех смыслах.

— «…Интересно по наполненности Божественной Любовью, если норма 90-95, почему у меня получается 75 ед.?»

Условно принятая шкала уровней наполненности Божественной Безусловной Любовью — до 100 ед.

Но эти 100 ед. — Божественная Любовь в чистом виде. И абсолютного показателя у представителей земных рас невозможно найти в принципе. И 95 ед. — идеальная норма, вообще возможная у человека.
Максимальный уровень, из того, что мне встречалось в моей практике, имел Просветлённый Пападжи (Бабаджи): между 95-98 ед. Если интересно — погуглите, в интернете много его записей и информации о нём.
Но у него и уровень подсознательной скрытой агрессии был соответствующий, ок. 10 ед. Меньше уже нельзя — человек просто не выживет в нашем мире. Который, по сути своей, грубый, жесткий, средне- и низкочастотный.
Для обычных людей, не Просветлённых, хороший показатель — 80-85-90 ед. К чему и следует стремиться.

Почему у вас получилось — 75 ед.?
Потому что остальные показатели диагностики, напрямую связанные с уровнем Божественной Безусловной Любви, были соответствующие, а их несколько: это, прежде всего, уровень подсознательной скрытой агрессии — его увеличение прямо пропорционально уменьшению Божественной Любви в человеке.

Это уровни наполненности Жизненной энергией, уровень ощущения Гармонии окружающего мира и сонастройка с Вселенной, уровень удовлетворения собственной жизнью и отсутствия-присутствия претензий к миру и людям, уровень адекватного восприятия себя, реальность своей самооценки: насколько человек переоценивает или недооценивает себя, насколько он живёт в иллюзиях.
Во всех этих показателях условно принятая шкала та же: max 100 ед. (до которых никто из живущих ещё не добрался)

— «..Конечно же, интересно как и почему вообще проявляются экстрасенсорные, магические способности, какие механизмы задействованы, насколько и каким образом это зависит от меня лично…»

Экстрасенсорные и магические способности даются (или не даются) человеку от рождения: это идёт из прежних инкарнаций, прежних жизней.
И это не такой уж редкий случай, как кажется — практически каждый второй человек имеет начальные и даже средние экстрасенсорные или магические способности, дар сверхчувственного восприятия (СЧВ).

Вся штука в том, что они НЕ ПРОЯВЛЕНЫ. И у многих они так и не проявляются, оставаясь на всю жизнь в скрытом латентном состоянии, или проявляясь частично и крайне незначительно.
И не так уж неверны утверждения отдельных учёных-исследователей о том, что в каждом их нас заложены особые способности, каждый — экстрасенс, в той или иной мере.

Такого вот, чтобы — рраз! и бабахнуло молнией, клиническая смерть, кома и тому подобное, и человек ни с того ни с сего стал вдруг экстрасенсом, целителем, провидцем, магом — такого не бывает.
Это значит лишь то, что стремительно проявилось, активизировалось всё, что было заложено от рождения. И такое одномоментное проявление крайне редко — человек как правило не готов, он не знает что с этим делать, ему неудобно жить по-новому, а по-старому он уже не может.
Но это крайний вариант, в основном эти способности проявляются постепенно, щадяще для своего носителя, в тех ситуациях, когда человек так или иначе внутренне подготовлен.
К примеру, мои собственные экстрасенсорные способности проявились лет 10-11 назад, тогда они составляли ок. 40% от имеющегося. Сейчас — 75-80%. Дар СЧВ начал проявляться с подросткового возраста, оч. незначительно, незаметно, лет 12 назад он был проявлен наполовину. Сейчас проявленность также ок. 75%.

Человек, активно познающий окружающий мир и Вселенную, законы Мироздания; человек толерантный и пластичный, допускающий и принимающий многое из того, что кажется бредом или невозможным в принципе, не отвергающий и не отрицающий ничего — и в себе и в окружающем мире; созвучный и сонастроенный с гармонией Вселенной, открытый для перемен имеет все шансы проявить в себе то, что заложено в нём от рождения.

И — да, это от нас всё же зависит. Я знаю нескольких людей, сугубо земных и ригидных, носящих внутри как жемчужину в раковине способности, которые, скорее всего, так и уйдут с ними, не проявившись в этой инкарнации. Потому что они готовы решительно «вывести на чистую воду» и высмеять, если кто-то хотя бы попытается открыть им глаза на то, чем они владеют — сами того не зная.
Они даже не допускают такой возможности по отношению к себе.

— «..Что такое СЧВ и яснознание, и как оно работает?»

СЧВ, сверхчувственное восприятие. Уже один этот термин — сверх-чувственное, сверх-чувства — определяет, что представляют собой эти способности. Это когда видишь, ощущаешь, слышишь, и воспринимаешь мир всеми своими чувствами больше, чем остальные.

Это и абсолютный музыкальный слух, и редкая способность определять малейшие, незаметные другим оттенки цветов, и удивительная способность безошибочно определить место, где есть вода и можно копать колодец — таких раньше называли лозоходцами; и неуловимые для других запахи.
Я, к примеру, в подростковом возрасте могла по запаху определить, что у этого вот человека опасно высокий уровень сахара в крови: для меня больные сахарным диабетом пахли по-особому.
Меня удивляло, что другие этого не замечают: на мой взгляд, эти люди пахли просто нестерпимо. И я искренне страдала, когда волею судьбы мне пришлось сидеть за одной партой с девочкой-диабетиком.

К СЧВ-способностям можно отнести высокий уровень интуиции, высокий уровень эмпатии, способность начального уровня предвидеть некоторые события — за несколько минут, часов, дней, недель; способность видеть скрытые эмоции, ложь, фальшь или искренность в человеке. Способность безошибочно ощущать скрытую опасность или угрозу, — исходящую от человека, места, предмета или вещи, от обстоятельств или происходящих событий.

По большому счёту, наиболее яркими носителями этих способностей являются… животные: кошки, собаки, птицы и т.д.

Яснознание чем-то схоже с СЧВ: это когда безошибочно знаешь, что всё именно так, а не иначе, но не можешь объяснить — почему. Просто знаешь, и всё.
Яснознающий человек определяет, знает заранее развитие событий, конечные результаты происходящих процессов, ему ясно видна причинно-следственная связь между всеми и всем, что его окружает, он знает и видит суть вещей, людей, событий.
Он вряд ли станет банкротом, или попадёт в ненужное место в ненужное время.

1. Что такое пастырское наставление?

Пастырское наставление – не специальный метод консультации пастора или священника. Пастырское наставление древнее самой цивилизации. Прототипом пастыря был знахарь, игравший одновременно роль врачевателя и жреца. Он сражался со злыми духами с помощью магии и веры. Он лечил больных и пытался защитить свое племя от безличных сил природы. Первые книги о пастырском наставлении, или о «врачевании душ», были написаны в пятом столетии, когда исповедь, одобрение и прощение, получаемые через священника, вошли в обычай и, по убеждению людей, вели к благотворным результатам.

Хотя «врачевание душ» всегда было обязанностью пастора, пастырское наставление вступило на новый путь благодаря богословской подготовке Антона Бойсена и его собственной психической болезни. В 1922 году, после неоднократного стационарного лечения, Бойсен начал учиться в Бостонской психиатрической больнице; позже он работал в Вустерском государственном госпитале. В итоге всего этого – его психоза и его разностороннего образования – Бойсен приступил к своим экспериментам. В 1925 году он привел студентов-богословов на работу в больницу в качестве обслуживающего персонала, чтобы они могли получить непосредственную информацию и клиническую подготовку. С этих пор взаимоотношение между психическим расстройством и религиозным опытом все больше привлекало внимание публики.

2. Подготовка к пастырскому наставлению.

Как показало проведенное Сэмюэлем Близзардом в 1956 году обследование 690 протестантских священников, приходский священник должен быть в наше время специалистом в шести основных областях: он исполняет обязанности администратора, организатора, пастыря, проповедника, священника и учителя. Пастырские обязанности (в том числе наставление) занимают около четверти его времени. Поэтому в большей части учебных заведений, готовящих священников, читаются теперь основные курсы психологии. Быстро возрастает и число священников, выполнивших дипломную работу по психотерапии. Понемногу растет и число священников, имеющих диплом психиатра или клинического психолога.

В 1963 году была основана Американская ассоциация пастырского наставления. Ассоциация устанавливает требования, предъявляемые к подготовке и практике. Она выдает дипломы священникам, сотрудничающим в специальных наставнических учреждениях, например капелланам, а также утверждает полномочия центров пастырского наставления и программы подготовки. Многие теологические школы при обучении своих студентов прибегают к помощи Совета клинической подготовки и Института пастырской опеки. Общепринятыми методами являются клиническая подготовка (в том числе письменные отчеты), индивидуальные оценки и обзоры смежных дисциплин, поручаемые преподавателям с надлежащими специальными знаниями.

3. Куда обращаются за наставлением.

Объединенная комиссия Соединенных Штатов по психическим болезням и охране психического здоровья провела исследование в национальном масштабе, с применением обычной выборочной техники, с целью выяснить, куда люди обращаются за помощью по своим личным проблемам. В результате были получены следующие статистические данные: к священнику – 42%; к врачу с общей медицинской подготовкой – 29%; к психиатру или психологу – 18%.

Источники профессиональной помощи, используемые людьми с ощущением надвигающегося нервного срыва, распределяются следующим образом: священник – 3%; врач с общей медицинской подготовкой – 88%; психиатр или психолог – 4%.

СЧ: определение и как найти СЧ

Статистические определения> Средние частоты

Что такое средние частоты?

Среднечастотный диапазон — это тип среднего или среднего значения. Электронные гаджеты иногда классифицируются как «средние», что означает, что они относятся к средней ценовой категории.

Формула для определения среднего диапазона = (высокий + низкий) / 2.

Пример задачи: Текущие цены на сотовые телефоны в магазине мобильных телефонов варьируются от 40 долларов (самый дешевый) до 550 долларов (самый дорогой).Найдите средние частоты.
Шаг 1. Добавьте наименьшее значение к наибольшему: 550 долларов США + 40 долларов США = 590 долларов США.
Шаг 2: Разделите шаг 1 на два: 590 долларов / 2 = 295 долларов.
Телефоны средней ценовой категории будут стоить около 295 долларов.

Разница между средним и дальним диапазоном.

Диапазон — это мера разброса. В примере с мобильным телефоном диапазон будет следующим: 550–40 долларов = 510 долларов. Диапазон также может означать весь диапазон чисел — например, он может быть записан как от 40 до 550 долларов. Среднее значение делает шаг вперед и делит диапазон на два, чтобы найти тип среднего.

Разница между средним и межквартильным диапазоном.

Среднечастотный диапазон часто путают с межквартильным диапазоном (IQR), который иногда называют «средним пятидесятилетием». На самом деле они означают очень разные вещи. Средний диапазон — это тип среднего, в то время как межквартильный диапазон говорит о фрагменте данных в середине набора данных.

Например, когда служба погоды сообщает, что «средняя дневная температура» составляет 77 градусов, они говорят о среднем диапазоне.Они получили это число, взяв сумму высокой дневной температуры и низкой дневной температуры и разделив на 2. Допустим, зарегистрированные дневные температуры были:
55, 65, 67, 69, 70, 80, 81, 87, 90
Высокий = 90
Низкий = 55
Средний = (90 + 55) / 2 = 154/2 = 77.

IQR для этого набора данных — это 25-й процентиль, вычтенный из 75-го процентиля:
25-й процентиль: 66
75-й процентиль: 84
Межквартильный диапазон: 84-66 = 18

Посетите наш канал YouTube, чтобы получить дополнительную статистику, помощь и советы!

————————————————— —————————-

Нужна помощь с домашним заданием или контрольным вопросом? С помощью Chegg Study вы можете получить пошаговые ответы на свои вопросы от эксперта в данной области.Ваши первые 30 минут с репетитором Chegg бесплатны!

Комментарии? Нужно опубликовать исправление? Пожалуйста, оставьте комментарий на нашей странице в Facebook .

Определение средних частот по Merriam-Webster

1 : диапазон средней длины

2 : средняя точка диапазона (по расстоянию или времени)

3 : средняя часть (по диапазону музыкального тона)

4 : среднее арифметическое наибольшее и наименьшее наблюдение группы.

Что такое диапазон и среднечастотный диапазон — видеоурок с практикой

Помимо среднего значения, медианы или режима, существует несколько других полезных мер, которые помогут вам при анализе набора данных.

Когда вы смотрите на набор данных, часто вы можете захотеть понять разброс данных или разрыв между наименьшим и наибольшим числом.

Пройдите тест и проверьте свой потенциал GED.

Транскрипция видео

Итак, это диапазон данных, и чтобы найти этот диапазон, мы вычитаем наименьшее значение набора данных из его наибольшего значения.

Чтобы дать вам пример, если набор данных состоит из \ (2, \, 3, \, 5, \, 4, \, 5, \, \) и \ (5, \), наименьшее значение набора — это \ (2 \), а наибольшее значение набора — \ (5 \).Таким образом, диапазон набора равен \ (5 \) минус \ (2 \), что составляет \ (3 \).

Также может быть полезно знать, какое число или значение находится посередине между наименьшим и наибольшим значением набора данных. Это значение или число мы называем средним диапазоном.

Чтобы обнаружить этот средний диапазон, мы должны сложить наибольшее и наименьшее значения вместе и разделить это число на \ (2 \). Или, говоря другими словами, найдите среднее из наибольших и наименьших значений набора.

В наборе данных \ (2, \, 5, \, 3, \, 4, \, 5, \, \) и \ (5 \) средний диапазон: \ (\ frac {2 + 5} { 2} = \ frac {7} {2} = 3.5 \)

Давайте взглянем на другие примеры.

Пример 1
Проблема: Определите средние и дальние частоты для следующего набора чисел: \ (2, \, 7, \, 4, \, 10, \, 35, \, 14 \, \).

Диапазон равен \ (35-2 \), то есть \ (33 \). Чтобы определить диапазон, вычтите наименьшее значение набора чисел из наибольшего значения набора.

Средний диапазон: \ (\ frac {35 + 2} {2} = \ frac {37} {2} = 18,5 \)

Сложите наибольшее и наименьшее значения набора и разделите это число на два.

Ответ:

Диапазон: \ (33 \)

Средние частоты: \ (18,5 \)

Пример два
Проблема: Найдите средние частоты и диапазон для этого набора чисел: \ (62, \, 20, \, 88, \, 145, \, 105, \, 37, \, 93, \, \ ) и \ (22 \).

Наименьшее число — \ (20 \). Поскольку этот набор данных находится в порядке от наименьшего к наибольшему, сначала найдите наименьшее и наибольшее число.
Наибольшее число \ (145 \)

Диапазон равен \ (145 \) минус \ (20 \), что составляет \ (125 \).Вычтите наименьшее значение набора из наибольшего значения набора, чтобы определить диапазон.

Среднечастотный диапазон: \ (\ frac {145 + 20} {2} = \ frac {165} {2} = 82,5 \)

Теперь складываем наименьшее и наибольшее значения и делим это число на два.

Ответ: Диапазон: \ (125 \) и средний диапазон: \ (82,5 \)

Последнее обновление 18 августа 2021 г.

Среднечастотный калькулятор

Среднечастотный калькулятор — это самый простой и элегантный способ найти среднечастотный диапазон в наборе данных .

Наш инструмент быстро найдет максимальное и минимальное значения входных чисел и вычислит так называемое среднее-экстремальное.

Возможно, вы захотите узнать больше о средних частотах в статистике, различиях между диапазоном и средним диапазоном, а также советы о том, как найти средний диапазон в наборе данных. Всю эту информацию вы найдете в статье ниже. ⤵️

Что такое средний уровень в математике? Статистика и математика средних частот

Итак, что такое СЧ? Мы определяем средний диапазон, как в математике, так и в статистике, как арифметическое среднее максимального и минимального значений набора данных .

Средний диапазон, являясь средней точкой диапазона, является одним из показателей центральной тенденции . Продолжайте читать, чтобы узнать, как найти средний диапазон набора данных с помощью формулы среднего диапазона.

Как пользоваться среднечастотным калькулятором? Как рассчитать СЧ?

Что может быть проще! Введите желаемые значения в пустые поля калькулятора. — калькулятор медленно развернется, как только вы введете значение в предыдущее поле.

💡 Наш калькулятор позволяет ввести целых уравнения в пустые поля.Попробуйте ввести, например, 5 * 3 или 6 + 4567 . Мы рассчитаем все автоматически .

Вы можете ввести до 30 номеров . Ваш результат будет состоять из максимального, минимального, среднего значения и пошагового решения .

Для получения точного результата необходимо ввести как минимум две переменные . Если вы хотите узнать, как вычислить средний диапазон вручную , проверьте раздел с формулой среднего диапазона ниже.

Как найти средние частоты?

У вас уже все просчитано? Теперь, когда вы знаете, как рассчитать средние частоты с помощью нашего инструмента, пришло время узнать, как мы это сделали! В нашем калькуляторе используется следующая формула средних частот:

средний диапазон = (максимальное значение [I] + минимальное значение [I]) / 2

, где I — набор данных. Давайте рассмотрим этот простой пример:

Каков средний диапазон следующего набора данных?

I = {5, 45, 789, 0.5, 0.0000005, 0, 25, 1, 12456}

Давайте найдем минимальное значение набора данных.

0

Давайте найдем максимальное значение набора данных.

12456

Используйте формулу среднего диапазона :

СЧ = (12456 + 0) / 2 = 12456/2

СЧ = 6228

Как видите, вычисление среднего диапазона для большего набора данных может быть проблематичным — именно тогда использование этого калькулятора среднего уровня становится необходимым.

Мы уже узнали о среднем диапазоне и о том, как найти средний диапазон набора данных — но какие все другие инструменты используются в описательной статистике и статистической дисперсии (разброс) ?

Мы используем разброс до , сравниваем разные наборы данных . Благодаря статистической дисперсии мы можем сказать, насколько данная группа значений растянута или сжата .

Мы можем использовать межквартильный размах (или средний спред ), который описывает разницу между 25% и 75% набора данных.
Наиболее распространенный способ описания дисперсии — использовать калькуляторы среднего-среднего уровня среднего уровня:

Среднее арифметическое — самый популярный метод из всех; и
Мы часто используем средневзвешенное значение при выставлении оценок.

Статистики предпочитают более сложных методов , таких как вычисление стандартного отклонения и распределения заданного набора данных. С помощью этих значений мы можем оценить чувствительность и специфичность наших результатов.
Не стоит забывать и о таких простых вычислениях , как диапазон дат ! 📅

Все еще жаждете знаний? Проверьте калькулятор дальности выстрела 🚀

Как узнать, подходит ли хранилище среднего класса для вашей компании

СХД среднего уровня превратилась в наиболее важный сегмент на рынке хранилищ, поскольку отрасль сместила акцент с монолитных массивов высокого класса на устройства среднего уровня в ответ на сокращение бюджетов.Поставщики внесли свой вклад в эту тенденцию, перенеся высокопроизводительные функции, такие как службы данных и упрощенное управление, на свои устройства среднего уровня, что упростило их использование и развертывание.

Это вызывает несколько вопросов. Как объективно определяется этот сегмент рынка? Какие различия, если таковые имеются, существуют между предложениями поставщиков? Как можно использовать хранилище среднего уровня для решения конкретных бизнес-задач? Какое влияние окажут стандарты управления Промышленной ассоциацией сетей хранения данных? И самый важный вопрос к лицам, принимающим решения в области ИТ в организациях: как правильно приобрести хранилище среднего уровня?

Так что же такое хранилище среднего уровня?

У каждого поставщика свое определение среднечастотного диапазона.Некоторые определяют пространство по размеру рынка или по скорости и подаче. Другие определяют это по тому, как хранилище помещается в шкаф и включены ли серверы.

Джей Кроун, директор EMC по маркетингу платформ CLARiiON, определяет средний уровень как «не Symmetrix» — другими словами, не как систему с монолитной архитектурой. Модульные (средние) системы — это системы хранения, готовые к использованию, которые позволяют добавлять диски, контроллеры и программное обеспечение по мере необходимости. Системы среднего уровня обычно имеют менее восьми портов Fibre Channel для подключения к хосту и масштабируются за счет добавления как дисковых корпусов, так и контроллеров RAID.

Монолитные системы, такие как массивы EMC Symmetrix, IBM ESS или HDS Thunder, обеспечивают головокружительное количество возможностей подключения к хостам и доступности данных, и все это в блестящем шкафу размером с холодильник. Хотя большинство монолитных систем могут увеличивать емкость за счет увеличения количества дисков, контроллеров или процессоров хранения, это не добавление «на лету». Гибкость, предлагаемая в системах хранения среднего уровня, дает администраторам возможность начать с малого уже сегодня и наращивать объемы по мере роста требований бизнеса.

Стоимость покупки — еще один определяющий аспект сегмента хранилищ среднего уровня. Системы среднего уровня начинаются с десятков тысяч долларов и могут быть приобретены всего с семью дисками. Даже самые маленькие системы часто включают диспетчер Java для легкой настройки и некоторого уровня служб данных. Как обработка, так и мощность большинства предложений среднего уровня могут быть увеличены по мере необходимости с помощью обновлений данных на месте. Прошли те времена, когда модернизация вилочных погрузчиков обычно ассоциировалась с монолитными системами с низкой ценой в сотни тысяч долларов.

Функции для простоты использования и развертывания

ИТ-отделы, использующие продукты среднего уровня, редко имеют специального администратора хранилища, который хорошо разбирается в деталях этих устройств. Фактически, такой администратор обычно управляет всей инфраструктурой, а не только хранилищем. Производители среднего уровня осознают это и стремятся предложить простоту использования и развертывания.

Примером такого подхода является профилирование приложений на StorEdge 6320 от Sun Microsystems, — говорит Джейсон Шаффер, менеджер группы Sun по маркетингу в области СХД среднего уровня.«Используя нашу методологию профилирования приложений, заказчик может быстро настроить систему с использованием предопределенных конфигураций для удовлетворения конкретных требований сегодняшних приложений к производительности, емкости, росту и доступности», — поясняет он.

Sun определила пять основных рабочих нагрузок приложений, таких как Oracle OLTP, и провела обширные тесты системы, чтобы определить лучшую конфигурацию для каждой, что исключает дорогостоящие внутренние процедуры тестирования.

Том Ралленс, директор по корпоративным модульным массивам в HP Network Storage Solutions, утверждает, что продемонстрированное его компанией время настройки системы составляет 20% от того, что требовалось для устаревших систем.По всей отрасли поставщики внедряют централизованное управление и предварительно настроенные параметры, чтобы упростить жизнь перегруженным администраторам.

Службы данных включают в себя утилиты удаленной репликации и моментальных снимков, которые позволяют администраторам создавать и перемещать копии данных в одной или нескольких системах. Эти функции были опорой монолитных систем на протяжении многих лет, но теперь они переходят на устройства среднего уровня.

IBM недавно объявила о добавлении функции клонирования (называемой VolumeCopy) в семейство дисковых устройств FAStT.Хотя эти служебные программы данных часто менее развиты, чем их монолитные аналоги, они предоставляют отличные инструменты, помогающие поддерживать доступность данных и обеспечивать согласованное резервное копирование без прерывания работы.

Стандарты управления и хранилища среднего уровня

Сегодняшние устройства хранения данных среднего уровня начинают включать спецификацию Storage Management Initiative Specification (SMI-S) от SNIA. SNIA приложила много усилий для разработки этого стандарта для общего интерфейса в сети хранения данных для обнаружения устройств, настройки компонентов и уведомления об ошибках.

Окончательная спецификация не была ратифицирована, чего многие поставщики ждут, прежде чем внедрить эту функциональность. На этом этапе предлагается, чтобы заказчики опросили своих поставщиков о будущей поддержке стандарта и определить требования к обновлению.

Как выбрать

Учитывая большое количество устройств хранения среднего уровня, выбор правильного решения для корпоративной среды может быть трудным. Следующий список вопросов можно использовать в качестве ориентира для потенциальных поставщиков перед принятием решения о покупке.

Сколько рекомендаций по внедрению может предоставить поставщик?

Предоставляет ли поставщик профили приложений, конфигурации кластера или установку на месте? Никто не хочет тратить много времени на изучение деталей системы, поэтому убедитесь, что ваш поставщик / интегратор хорошо разбирается в сложностях, с которыми вы обязательно столкнетесь.

Предоставляет ли система опцию диска ATA?

Диски ATA (IDE) быстро становятся выбором для дисковых систем резервного копирования.В сочетании со встроенными утилитами служб данных или сторонними приложениями резервного копирования ATA может стать отличным дополнением к ленточным системам.

Насколько разрушительным является обновление более крупной системы?

Каждый поставщик предлагает более крупную систему, но что требуется для перехода к этой системе? Вам нужно все заменить? Что происходит с данными? Обязательно спросите, что произойдет, когда придет время обновляться.

Как управляется система?

Интерфейсы управления Java являются стандартом для устройств среднего уровня, но не все одинаковы.Может ли интерфейс управлять несколькими системами? Есть ли альтернативный интерфейс управления для тех случаев, когда Java не подходит? Можно ли управлять системой через Интернет или вам нужно локальное соединение?

Насколько гибка система?

Может ли продукт поддерживать отраслевые стандарты по мере их развития? Предоставляет ли поставщик все необходимые служебные программы для передачи данных? Ограничивает ли архитектура общую емкость или количество RAID-контроллеров? В этом контексте попытайтесь представить себе свою организацию через два года и проблемы, с которыми она столкнется.

Добавит ли продукт новый уровень управления или он будет интегрирован в структуру SRM?

Последнее, что нужно администраторам, — это еще один интерфейс для освоения и еще один инструмент управления для поддержки. Интегрированный набор продуктов, работающих вместе и управляемый из одного интерфейса, — это SRM nirvana. Пока отрасль не сможет обеспечить нирвану, убедитесь, что выбранная вами система хранения среднего уровня интегрирована или скоро будет интегрирована в общую структуру управления сетью организации.

Какие функции настоящие, а какие — шумиха?

ИТ-индустрия хорошо известна тем, что рекламирует функции за много месяцев до того, как они будут готовы. Убедитесь, что те, которые соответствуют вашим требованиям, работают и прошли проверку на рынке. К счастью, существуют независимые от поставщиков аналитические фирмы, которые проводят углубленное тестирование и проверку реальности. Попросите вашего поставщика поделиться с вами отчетом о тестировании и убедитесь, что ваши бизнес-требования удовлетворяются с помощью продукта, который будет расти вместе с вашими потребностями.

Майкл Макси — старший аналитик Progressive Strategies в Нью-Йорке.

Что такое низкочастотный динамик?

i Hemera Technologies / AbleStock.com / Getty Images

НЧ-динамик — это тип динамика, который воспроизводит звуки в диапазоне средних и низких частот. Громкоговорители, классифицируемые как «твитеры», воспроизводят чистые высокочастотные или высокочастотные звуки.Громкоговорители, классифицируемые как «вуферы», воспроизводят низкочастотные звуки. «Сабвуферы» издают самые низкие звуки. Если вы разберете классы звука дальше, у вас будут звуковые частоты, классифицированные как «средние», обозначение, перекрывающее как высокие, так и низкие частоты. Среднечастотные динамики охватывают диапазон верхних басов и нижних средних частот.

Частоты звука

Звук распространяется по воздуху волнами, которые колеблются или колеблются между двумя крайностями с разной скоростью.Один полный цикл за одну секунду равен 1 герцу, обычно обозначаемому как «Гц». Каждый шаг имеет разную частоту или количество колебаний в секунду. Чем ниже частота, тем ниже высота звука.

Среднечастотные частоты

Люди могут слышать звуки с частотой от 20 до 20 000 Гц. Низкие частоты охватывают от 20 до 1000 герц, высокие — от 1000 до 20 000 герц, а средние частоты перекрываются от 300 до 3000 герц. Диапазон средних басов составляет примерно от 140 до 400 герц.Средне-басовый низкочастотный динамик — это динамик, специально разработанный для работы с этой звуковой частотой.

Среднечастотный диапазон

Среднечастотный диапазон — важная часть звукорежиссуры, поскольку он охватывает тембры оркестровых инструментов, таких как валторны, виолончели и фаготы. Большинство мужских голосов также попадают в этот диапазон, будь то пение или речь. Если у вас слишком большой диапазон средних басов в вашей звуковой системе по сравнению с другими диапазонами, избыток сделает звучание тонов «мутным», что является обычным звуковым термином, обозначающим нечеткость звука.Если у вас слишком мало средних басов, вы потеряете некоторые из важных тонов в этом диапазоне, и слушатели будут воспринимать звуки как лишенные глубины или тепла.

Компьютеры среднего уровня: определение и программное обеспечение — видео и стенограмма урока

Fault Tolerant Technology

Представьте, что в следующем купленном вами автомобиле будет запасное колесо, которое автоматически встанет на место, если у вас спустится.Даже перед лицом катастрофического выброса вы можете продолжить свое путешествие без перерывов. Компьютеры среднего уровня из-за их вспомогательной роли в критических задачах часто проектируются с аналогичными отказоустойчивыми системами.

Поскольку компьютеры среднего уровня способны поддерживать большое количество пользователей в сети, они часто создаются с использованием отказоустойчивой технологии. Отказоустойчивые системы имеют резервные элементы, такие как жесткие диски, блоки питания, карты памяти и т. Д., Которые предназначены для резервного копирования в случае сбоя.Если одна из частей выходит из строя, дополнительная срабатывает практически без задержек или перебоев в работе. Если сервер поддерживает людей, выполняющих критически важную задачу, отказоустойчивые технологии гарантируют минимальное время простоя.

Программное обеспечение для компьютеров среднего уровня

Большинство людей знакомы с операционными системами, используемыми на персональных компьютерах, такими как Windows или IOS. Итак, что насчет компьютеров среднего уровня? Какие типы операционных систем они используют? Что ж, многие компьютеры среднего уровня используют UNIX или проприетарный вариант UNIX.

UNIX — это операционная система, которая существует с 1970-х годов. Системы UNIX предназначены для одновременного запуска множества приложений. Несколько клиентов могут получить доступ к системе UNIX одновременно, что делает операционную систему идеальной для поддержки сети пользователей. Некоторые производители компьютеров среднего уровня имеют свои собственные версии UNIX, такие как AIX от IBM или HP-UX от Hewlett Packard.

Причина, по которой большинство компьютеров среднего уровня используют некоторые разновидности UNIX, заключается в том, что и UNIX, и компьютеры среднего уровня предшествовали персональному компьютеру.Многопользовательские системы UNIX, основанные на вычислительных платформах среднего уровня, существуют гораздо дольше, чем сети на базе ПК.

Приложения, работающие на компьютерах среднего уровня, аналогичны приложениям, работающим на мэйнфреймах (обработка транзакций, большие базы данных и т. Д.), Только в меньшем масштабе. Подумайте о сотнях пользователей среднего уровня, а не о тысячах пользователей на мэйнфрейме.

Компьютеры среднего уровня сегодня

В настоящее время IBM является ведущим производителем компьютеров среднего уровня и производит компьютеры среднего уровня с 1969 года.Hewlett Packard — еще один давний производитель компьютеров среднего класса и предлагает текущие модели. У Oracle есть свои серверы среднего уровня SPARC, которые изначально были разработаны Sun Microsystems. Oracle приобрела Sun в 2010 году.

В целом, категория среднего уровня определенно снизилась по сравнению с пиком. Персональные компьютеры стали намного мощнее и с каждым годом могут работать больше, чем компьютеры среднего уровня.

Краткое содержание урока

Компьютеры среднего уровня занимают среднее место между персональным компьютером (меньшим, менее мощным) и мэйнфреймом (большим, более мощным).Сегодня компьютерам среднего класса часто ставят задачу быть серверами , предоставляющими хранилище, обработку и другие ресурсы для сетевых клиентов или, другими словами, пользователей. Когда пользователь сети обращается к серверу среднего уровня через терминал с ограниченными собственными возможностями, это называется использованием тонкого клиента .

Поскольку компьютеры среднего уровня могут быть центральным звеном критически важной сети, они часто строятся с использованием отказоустойчивой технологии , то есть в случае выхода из строя какого-либо компонента его место легко заменяет другой.Многие компьютеры среднего уровня работают под управлением UNIX , предназначенного для одновременного запуска множества приложений. Они также используют проприетарную версию UNIX.

РубрикаРазное

Что такое счв: СЧВ — это… Что такое СЧВ?

что означает, как переводится на английский язык, кто такой чсвшник

Происхождение термина

Современные представления

Соцсети и онлайн-игры

Опасность ЧСВ и как не попасть в ловушку

5. Природа СЧВ.. Введение в психиатрию и психоанализ для непосвященных

Читайте также

ПРИРОДА ТВОРЧЕСТВА

Природа человека

ПРИРОДА КОНЦЕПЦИИ

Природа психического

Природа восприятия

Природа мышления

5. Природа СЧВ.

Природа власти[33]

Природа перемен

Природа биологическая

Природа социальная

Природа духовная

Природа культура

Шестое чувство — Школа Олега Андреева

Программа «Шестое Чувство» — развитие потенциала и интуиции

Развитие интуиции по программе «Шестое Чувство»

Медитативная практика: специфика и особенности

Индукционные плавильные печи 5-200 кг

Видео товара:

Сопутствующие товары

Методы цитохимического и иммуноцитологического исследования клеток крови и кроветворных органов

Цитохимические методы

Иммуноцитологические методы

Цитологические препараты

Хранение

Фиксация

Техника проведения иммуноцитохимических методов

Цитохимические методы определения активности ферментов в составе иммунных комплексов

Литература

Отвечая на вопросы… Из переписки

1. Что такое пастырское наставление?

2. Подготовка к пастырскому наставлению.

3. Куда обращаются за наставлением.

СЧ: определение и как найти СЧ

Что такое средние частоты?

Разница между средним и дальним диапазоном.

Разница между средним и межквартильным диапазоном.

Определение средних частот по Merriam-Webster

Что такое диапазон и среднечастотный диапазон — видеоурок с практикой

Транскрипция видео

Среднечастотный калькулятор

Что такое средний уровень в математике? Статистика и математика средних частот

Как пользоваться среднечастотным калькулятором? Как рассчитать СЧ?

Как найти средние частоты?

Как узнать, подходит ли хранилище среднего класса для вашей компании

Что такое низкочастотный динамик?

Частоты звука

Среднечастотные частоты

Среднечастотный диапазон

Рекомендации

Компьютеры среднего уровня: определение и программное обеспечение — видео и стенограмма урока

Fault Tolerant Technology

Программное обеспечение для компьютеров среднего уровня

Компьютеры среднего уровня сегодня

Краткое содержание урока

Добавить комментарий Отменить ответ